Kuvaa yksityiskohtaisesti fluoresoivien koettimien valintavaiheet ja menetelmät konfokaalimikroskopiaa varten
Konfokaalimikroskoopeilla tehdyissä kokeissa jotkin kokeelliset indikaattorit voidaan havaita käyttämällä itse näytteen tai eksogeenisten aineiden autofluoresenssia, mutta suurimmalla osalla testattavista aineista ei ole mitattavissa olevaa fluoresenssia ja ne on leimattava fluoresoivilla koettimilla. Siinä on mitattavissa oleva fluoresoiva signaali. Joten, kuinka valita fluoresoivat anturit konfokaalimikroskopiaan?
1. Määritä testattavat indikaattorit kokeen tarkoituksen mukaan
Kun havaitsemisindeksi on määritetty, määritetään myös fluoresoivien koettimien valintaalue. Voidaan nähdä, että valinnan, mitä fluoresoivaa koetinta käytetään kokeessa, määrää kokeen tarkoitus. Esimerkiksi jos kokeen tarkoituksena on tutkia kalsiumionien muutoksia sydänlihassoluissa eteisvärinän esiintyessä, voidaan todeta, että testattava aine on sydänlihassoluissa olevia kalsiumioneja ja fluoresoivien koettimien valintaalue on rajoitettu kalsiumionikoettimet, jotka voivat merkitä eläviä soluja. Neula.
2. Määritä käytettävissä olevien fluoresoivien koettimien valikoima
Jos kokeen tarkoituksena ei ole uusien fluoresoivien koettimien tutkiminen, voit käyttää kypsiä koettimia ja merkintämenetelmiä uusille koeaineille tai indikaattoreille. Fluoresoivien koettimien tyyppi tai valikoima, jotka voivat merkitä testattavan aineen, voidaan määrittää etsimällä kotimaassa ja ulkomailla tunnettujen reagenssiyritysten virallista kirjallisuutta tai tuoteluetteloita.
3. Selvitä, täyttävätkö fluoresoivan anturin ominaisuudet fluoresoivien näytteiden valmistusvaatimukset
Fluoresoivien koettimien ominaisuudet vaikuttavat suoraan näytteiden leimaamiseen ja koetuloksiin. Siksi ennen fluoresoivien koettimien valitsemista ja näytteiden leimaamista kokeessa on välttämätöntä ymmärtää täysin niiden fluoresenssiominaisuudet. Fluoresoivien koettimien tutkittavia ominaisuuksia ovat:
1. Valoanturien ja näytteiden reaktio-ominaisuudet
2. Fluoresoivien koettimien herkkyys ja fluoresenssin intensiteetti
3. Fluoresoivilla koettimilla leimattujen näytteiden spektriominaisuudet
4. Fluoresenssin stabiilisuus
5. Vuorovaikutus näytteen usean fluoresenssin välillä
