Fluoresenssimikroskoopin erityinen rakenne sisältää:
(I) Värisuodatinjärjestelmä
Värisuodatin on tärkeä osa fluoresenssimikroskooppia, sen ydinkomponentteja ovat viritysvalosuodatin (ensimmäinen sulkusuodatin), emissiovalosuodatin (toinen sulkusuodatin) ja puoliksi läpinäkyvä ja puoliksi anti-suodatin (säteen jakava peili) . Eri valmistajien värisuodatinmalleja, nimi ei usein ole yhtenäinen.
1. Viritysvalon suodatin ja emissiovalosuodatin: valitse valonlähteen ja fluorokromin ominaisuuksien mukaan yleensä seuraavat kolme sovitustyyppiä, jotta saadaan tietty viritysvalon aallonpituusalue ja näytteen viritys fluoresenssin läpi okulaari kuvantamiseen.
UV-viritys: Viritysvalosuodatin mahdollistaa UV-valon läpäisyn ja estää näkyvän valon kulkua yli 400 nm:ssä. Vastaava emissiosuodatin mahdollistaa sinisen valon läpikulun, joka näkyy näkökentässä sinisenä esim. DAPI-värjäykseen.
Sinisen valon viritys: Viritysvalosuodatin päästää sinisen valon läpi ja estää muut valon aallonpituudet. Vastaava emissiosuodatin mahdollistaa vihreän valon läpikulun esim. GFP-värjäysmarkkereille.
Vihreä viritys: Virityssuodatin päästää vihreän valon läpi ja estää muut aallonpituudet. Vastaava emissiosuodatin päästää yleensä punaisen valon läpi, esim. rodamiinivärjäys.
2. Puoliksi läpinäkyvä ja puoliksi heijastava suodatin: sen tehtävänä on täysin estää valon virittyminen heijastuksen läpi; ja säteilevän valon vastaavan aallonpituusalueen läpi. Sen malli ja valosuodattimien viritys ja valosuodattimien emissio vastaavat.
(B) objektiivilinssi ja okulaari
Objektiivilinssejä voidaan käyttää monenlaisia, mutta * hyvä valinta symmetrinen, akromaattinen objektiivilinssi, koska sen autofluoresenssi on hyvin pieni ja valonläpäisyominaisuudet (aallonpituusalue) sopivat fluoresenssiin. Koska kuvan fluoresenssikirkkaus mikroskoopin näkökentässä on verrannollinen objektiivin kuonotaajuuden neliöön ja kääntäen verrannollinen sen suurennukseen, fluoresenssikuvan kirkkauden parantamiseksi objektiivin, jolla on suuri kuonotaajuus, tulisi käyttää. Erityisesti fluoresenssi ei ole tarpeeksi vahva näytteitä, tulisi käyttää suurta suunopeus, korkea valonläpäisy objektiivi, mahdollisimman alhainen okulaari.
(C) muut optiset laitteet
Heijastin, sen heijastava kerros on yleensä alumiinipinnoitettu, koska alumiini ultraviolettisäteilyn ja näkyvän valon absorptio sininen-violetti alueella vähemmän, heijastaa jopa 90% tai enemmän (kun taas hopean heijastavuus on vain 70%). Yleensä käytetään litteitä heijastimia. Kohdevalopeili, suunniteltu ja valmistettu erityisesti fluoresenssimikroskopiaan kvartsilasista tai muusta UV-läpinäkyvästä lasista valmistettu kohdevalopeili. Putoavan valon laite, joka läpäisevän valonlähteen toiminnan lisäksi soveltuu paremmin läpikuultaville ja läpikuultaville näytteille, kuten paksukalvolle, suodatinkalvolle, pesäkkeelle, kudosviljelmälle ja muille näytteille suoraa tarkkailua varten. Viime vuosina on kehitetty uudentyyppinen fluoresenssimikroskooppi, jossa käytetään putoavan valon laitetta, nimeltään putoava fluoresenssimikroskooppi.
(D) valonlähde
Nykyään valonlähteenä käytetään 50 tai 100 W korkeapaineista elohopealamppua. Kahden elektrodin työskentely elohopean haihtumisen aiheuttaman purkauksen seurauksena ilmapallon paine nousee nopeasti (tämä prosessi kestää yleensä noin 5–15 minuuttia), ja valokvanttien emissioprosessissa vapautuvan valon aallonpituus riittää virittämään. kaikentyyppisiä fluoresoivia aineita, siksi fluoresenssimikroskopiaa käytetään yleisesti.
Elohopealampuilla on suhteellisen lyhyt käyttöikä, yleensä 200 tuntia, ja vastauksena tähän käyttöiän rajoitukseen on viime vuosina käytetty laajasti uutta loistelamppujen valonlähdettä, X-Citea, sen pitkän, 2000 tunnin lampun käyttöiän ja joustavan käytön vuoksi. - esilämmitystä ei tarvita, ja se on heti käyttövalmis.
