Mitä eroa on fluoresenssimikroskoopilla ja käänteisellä mikroskoopilla?
Mikroskooppi on tärkeä väline soluviljelyssä ja siihen liittyvissä johdannaiskokeissa. Tällä hetkellä markkinoilla on erilaisia mikroskooppeja. On haastetta valita tarpeitasi vastaava ja sopiva mikroskooppi. Seuraavassa esitellään käänteisten mikroskooppien ja fluoresenssimikroskooppien periaatteet, jotta voit valita helposti.
Käänteisen mikroskoopin koostumus on sama kuin tavallisen mikroskoopin, ja se sisältää pääasiassa kolme osaa: mekaanisen osan, valaistusosan ja optisen osan.
Käänteisen mikroskoopin koostumus on sama kuin tavallisen pystymikroskoopin, paitsi että objektiivilinssi ja valaistusjärjestelmä ovat päinvastaiset, edellinen on pinnan alla ja jälkimmäinen on lavan yläpuolella.
Tämä rakenne mahdollistaa valaistuksen keskitysjärjestelmän ja näyttämön välisen tehokkaan etäisyyden suurentamisen merkittävästi, mikä on kätevää paksumpien tarkkailtavien kohteiden, kuten petrimaljojen ja soluviljelypullojen sijoittamiseen (lasilevyt ovat tietysti myös hyväksyttäviä). Niiden välisen työetäisyyden ei tarvitse olla kovin suuri.
Käänteistä mikroskooppia käytetään mikro-organismien, solujen, bakteerien, kudosviljelmien, suspensioiden, sedimenttien jne. tarkkailuun lääketieteen ja terveydenhuollon yksiköissä, korkeakouluissa ja yliopistoissa sekä tutkimuslaitoksissa. Se voi jatkuvasti tarkkailla solujen ja bakteerien lisääntymis- ja jakautumisprosessia elatusaineessa ja voi valokuvata tämän prosessin missä tahansa muodossa.
Sitä käytetään laajasti sytologiassa, parasitologiassa, onkologiassa, immunologiassa, geenitekniikassa, teollisessa mikrobiologiassa, kasvitieteessä ja muilla aloilla.
Fluoresenssimikroskopiaa käytetään kemiallisten aineiden imeytymisen, kuljetuksen, jakautumisen ja lokalisoinnin soluissa tutkimiseen.
Tarkastettavaa kohdetta varten on kaksi tapaa tuottaa fluoresenssi: autofluoresenssi, joka lähettää fluoresenssia välittömästi ultraviolettisäteilyn jälkeen; sekundaarinen fluoresenssi, joka voi säteillä fluoresenssia sen jälkeen, kun tarkkailtava kohde on käsitelty fluoresoivilla väriaineilla ja sitten säteilytetty ultraviolettivalolla.
Jotkut soluissa olevat aineet, kuten klorofylli, tuottavat autofluoresenssia ultraviolettisäteiden säteilyttämisen jälkeen; jotkin aineet eivät pysty fluoresoimaan itsestään, mutta jos ne värjätään fluoresoivilla väriaineilla tai fluoresoivilla vasta-aineilla, ne voivat myös emittoi sekundaarista fluoresenssia ultraviolettisäteillä säteilytettyään.
Fluoresenssimikroskoopissa käytetään pistevalolähdettä, jolla on korkea valotehokkuus, ja se lähettää tietyn aallonpituuden (ultraviolettivalo 365 nm tai violetti sininen valo 420 nm) valoa värisuodatinjärjestelmän läpi viritysvalona sen jälkeen, kun näytteessä olevat fluoresoivat aineet on viritetty lähettämään niitä. eri fluoresenssin värejä ja tarkkaile sitten objektiivia ja okulaareja suurentamalla.
Voimakkaan kontrastitaustan alla, vaikka fluoresenssi on erittäin heikko, se on helppo tunnistaa ja sen herkkyys on korkea. Sitä käytetään pääasiassa solurakenteen ja toiminnan sekä kemiallisen koostumuksen tutkimiseen.
