Mikä on vaihekontrastimikroskooppi
Vaihekontrastimikroskooppi on mikroskooppi, joka voi muuntaa valon kulkiessa kohteen läpi syntyneen vaihe-eron (tai optisen polun eron) amplitudin (valon intensiteetin) muutokseksi. Käytetään pääasiassa elävien solujen, värjäytymättömien kudosleikkeiden tai värjättyjen näytteiden tarkkailuun, joissa ei ole kontrastia.
Ihmissilmä pystyy erottamaan vain näkyvän valon aallonpituuden (värin) ja amplitudin muutokset, mutta ei voi erottaa vaiheen muutoksia. Useimmat biologiset näytteet ovat erittäin läpinäkyviä, ja valoaaltojen amplitudi pysyy periaatteessa muuttumattomana läpikulkemisen jälkeen, vain vaihemuutoksilla.
Vaihekontrastimikroskooppi muuttaa periaatteessa näytteen läpi kulkevan näkyvän valon optisen polun eron amplitudieroksi, mikä parantaa eri rakenteiden välistä kontrastia ja tekee niistä selkeät ja näkyvät. Valo taittuu näytteen läpi, poikkeaa alkuperäisestä valoreitistä ja viivästyy 1/4 λ (aallonpituus), jos sitä lisätään tai vähennetään edelleen 1/4 λ, jolloin optisen reitin erosta tulee 1/2 λ. kaksi fotosynteettistä akselia vahvistuvat, ja amplitudi kasvaa tai pienenee, mikä lisää kontrastia.
Rakenteellisesta näkökulmasta ero faasikontrastimikroskopian ja tavallisen optisen mikroskopia välillä on:
1. Rengasmainen aukko Kalvo, jossa on pyöreä aukko, joka on asennettu valonlähteen ja lauhduttimen väliin muodostamaan onton valokartio, joka kulkee lauhduttimen läpi ja fokusoi sen näytteeseen.
2. Vaihe-eromikroskoopissa objektiivin sisäpuolelle on lisätty magnesiumfluoridilla päällystetty vaihelevy, joka viivästyttää suoran tai taittuneen valon vaihetta 1/4 λ:lla. Vaihelevyssä on kaksi aluetta, sitä osaa, jonka läpi suora valo kulkee, kutsutaan "konjugaattipinnaksi" ja osaa, jonka läpi kulkee taipunut valo, kutsutaan "kompensaatiopinnaksi". Vaihelevy on jaettu kahteen tyyppiin sen toimintavaikutuksen mukaan:
(1) Plus-vaihekortti: viivästyttää suoraa valoa 1/4 λ:lla, kahden valoaallon yhdistelmän jälkeen valoaaltojen amplitudi kasvaa ja näytteen rakenteesta tulee kirkkaampi kuin ympäröivä väliaine muodostaen kirkkaan kontrastin (tunnetaan myös nimellä negatiivinen kontrasti).
(2) B plus vaihelevy: viivästyy diffraktiovaloa 1/4 λ:lla, kun kaksi valonsädesarjaa yhdistyvät, valoaallot vähennetään ja amplitudi pienenee, mikä johtaa tummempaan näyterakenteeseen kuin ympäröivä väliaine, mikä muodostaa tumman kontrastin (tunnetaan myös positiivisena kontrastina). Vaihelevyllä varustettua objektiivia kutsutaan vaihekontrastiobjektiiviksi, ja sanaa "Ph" käytetään usein objektiivin ulkokuoressa.
