Darkfield-valaistusmenetelmä hiukkasten tarkkailuun mikroskoopilla
1. Läpinäkyvä valaistus
Biologisia mikroskooppeja käytetään usein läpinäkyvien näytteiden tarkkailuun, ja ne vaativat valaistusta läpäisevällä valolla. Valaistusmenetelmiä on kahdenlaisia
(1) Kriittisen valaistuksen valonlähde kuvataan objektitasolla sen jälkeen, kun se on kulkenut kondensaattorilinssin läpi, kuten kuvassa 5. Jos valoenergian häviö jätetään huomiotta, valonlähteen kuvan kirkkaus on sama kuin itse valonlähteen kirkkaus. Siksi tämä menetelmä vastaa valonlähteen sijoittamista kohdetasolle. On selvää, että kriittisessä valaistuksessa, jos valonlähteen pinnan kirkkaus on epätasainen tai siinä näkyy ilmeisiä pieniä rakenteita, kuten filamentteja, se vaikuttaa vakavasti mikroskooppiseen havaintovaikutukseen, mikä on kriittisen valaistuksen haittapuoli. Ratkaisu on sijoittaa maidonvalkoisia ja lämpöä absorboivia värisuodattimia valonlähteen eteen, jotta valaistus muuttuu tasaisemmaksi ja vältetään pitkäaikainen -altistus valonlähteelle, joka voi vahingoittaa tarkastettavaa kohdetta. Läpäisevällä valolla valaistuna objektiivin linssin kuvaussäteen aukkokulma määräytyy tarkennetun peilin neliömäisen säteen aukkokulman mukaan. Jotta objektiivin numeerinen aukko voitaisiin hyödyntää täysimääräisesti, tarkennuslinssillä tulee olla sama tai hieman suurempi numeerinen aukko kuin objektiivin.
(2) Kuolan valaistuksen kriittisen valaistuksen epätasaisen pinnan valaistuksen haittapuoli voidaan eliminoida Kuolan valaistuksessa. Lisää lisäkohdevalo 2 valonlähteen 1 ja kohdevalon 5 väliin, kuten kuvassa 6 on esitetty. Voidaan nähdä, että koska valonlähteen tasaisesti valaisemaa lisäkondensaattorilinssiä 2 (tunnetaan myös nimellä siipi) ei käytetä suoraan näytteen 6 kuvaamiseen, on objektiivin valaistun linssin näkökenttä (näyte) tasainen.
2. Putoavan valon valaistus
Tarkasteltaessa läpinäkymättömiä esineitä, kuten metallihiomalevyjä metallografisen mikroskoopin läpi, valaistus kohdistetaan usein sivulta tai ylhäältä. Tässä vaiheessa havaitun kohteen pinnalla ei ole lasipeitettä ja näytekuvan muodostus perustuu objektiiviin tulevaan heijastuneeseen tai hajaantuneeseen valoon. Kuten kuvasta 7 näkyy.
3. Valaistusmenetelmä hiukkasten havainnointiin käyttämällä tummaa näkökenttää
Tumman kentän menetelmää voidaan käyttää ultrapienten hiukkasten tarkkailuun. Niin kutsutut ultrahienot hiukkaset viittaavat pieniin hiukkasiin, jotka ovat pienempiä kuin mikroskoopin resoluutioraja. Tumman kentän valaistuksen periaate on estää päävalaistuksen valon pääsy objektiivin linssiin ja vain hiukkasten siroama valo pääsee objektiiviin kuvantamista varten. Siksi kirkkaiden hiukkasten kuva annetaan tummalla taustalla, ja vaikka näkökentän tausta on tumma, kontrasti on hyvä, mikä voi parantaa resoluutiota.
