Monifotonilaserpyyhkäisymikroskooppien vahvuudet ja rajoitukset
Edut ovat seuraavat:
1. Punaisen tai infrapunavalon virityksessä valon sironta on pientä (pienten hiukkasten sironta on kääntäen verrannollinen aallonpituuden neljänteen potenssiin).
2. Ei tarvita reikiä, jotka pystyvät keräämään enemmän hajaantuneita fotoneja kuvantamispoikkileikkauksesta.
3. Neulanreiät eivät pysty erottamaan hajaantuneita fotoneja, jotka lähtevät epätarkennetuilta tai polttoalueilta, ja monifotoneilla on parempi signaali-/-kohinasuhde syväkuvauksessa.
4. Näyte absorboi ja vaimentaa helposti yhden fotonin virittymiseen käytettyä ultraviolettivaloa tai näkyvää valoa ennen kuin säde saavuttaa polttotason, mikä vaikeuttaa syvien kerrosten viritystä.
5. Biologisen mikroskooppisen havainnoinnin kannalta tärkeintä on olla vahingoittamatta itse organismin aktiivista tilaa ja ylläpitää veden, ionipitoisuuden, hapen ja ravinteiden kiertoa. Valon havainnoinnin alalla sekä lämpö- että fotonienergian tulee pysyä säteilyannoksen sisällä ja valoenergian, joka ei vahingoita soluja.
6. Monifotonimikroskoopilla on myös monia etuja. Kolmiulotteisen-resoluution, syvyysinvaasion, sirontatehokkuuden, taustavalon, signaali---kohinasuhteen, ohjauksen jne. suhteen lasermikroskoopeilla on vertaansa vailla tai ylivoimaisia ominaisuuksia, joita aiemmilla lasermikroskoopeilla ei ollut.
Monifotoninen konfokaalinen laserpyyhkäisymikroskooppi on laajennettu useille tutkimus- ja sovellusaloille. Se voi suorittaa kolmiulotteisen ei--hajottavan havainnoinnin näytteille niiden luonnollisessa tilassa ja parantaa järjestelmän resoluutiota ja signaalin-/-kohinasuhdetta Hyödyntämällä materiaalin ominaisuuksien muutoksia monifotonivirityksen jälkeen}}kolmen{4{4}pituuden datan tallennus Kolmiulotteinen mikrovalmistus mihin tahansa suuntaan voidaan myös saavuttaa, jolla on korkea sovellusarvo. Voidaan uskoa, että monifotonikonfokaalimikroskopiaan liittyvien mekaanisten, materiaali- ja lasertekniikoiden kehittymisen myötä monifotonikonfokaalisen laserpyyhkäisymikroskopian kehitys ja sovellukset lisääntyvät.
Haitat ovat seuraavat:
1. Vain fluoresenssikuvaukseen.
2. Jos näyte sisältää kromoforeja, jotka voivat absorboida viritysvaloa, kuten pigmenttejä, näyte voi altistua lämpövaurioille.
3. Resoluutio on hieman pienempi, vaikka sitä voidaan parantaa käyttämällä samanaikaisesti konfokaalisia pieniä reikiä, signaali häviää.
4. Kalliiden ultranopeiden lasereiden rajoituksista johtuen monifotonipyyhkäisymikroskooppien kustannukset ovat suhteellisen korkeat.
