Fluoresenssimikroskopian periaatteet ja rakenteelliset piirteet
Fluoresenssimikroskooppi on pistevalonlähteen korkean valotehokkuuden käyttö värinsuodatusjärjestelmän kautta tietyn valon aallonpituuden (kuten ultravioletti 3650 tai violetti-sininen 4200) lähettämiseksi viritysvalona, fluoresoivan materiaalin virityksessä. näyte lähettää useita eri värejä fluoresenssia ja suurennetaan sitten objektiivin ja okulaarien läpi tarkkailua varten. Tällä tavalla voimakkaan kontrastin taustalla, vaikka fluoresenssi on erittäin heikko, se on helppo tunnistaa, korkea herkkyys, jota käytetään pääasiassa solujen rakenteen ja toiminnan sekä kemiallisen koostumuksen tutkimiseen. Fluoresenssimikroskoopin perusrakenne koostuu tavallisesta optisesta mikroskoopista sekä eräistä lisävarusteista (kuten fluoresenssivalonlähde, virityssuodattimet, kaksivärinen säteen erotin ja estosuodattimet jne.). Fluoresoiva valonlähde - yleisesti käytetty ultrakorkeapaineinen elohopealamppu (50-200W), joka voi lähettää eri aallonpituuksilla valoa, mutta jokaisella fluoresoivalla materiaalilla on voimakkain fluoresenssivirityksen aallonpituus, joten virityssuodattimia on lisättävä (yleensä ultravioletti, violetti, sininen ja vihreä virityssuodatin), niin että vain tietty aallonpituus herätevaloa säteilyttämällä näytteitä, kun taas toinen valo absorboituu. Joten on tarpeen lisätä virityssuodatin (yleensä ultravioletti-, violetti-, sininen ja vihreä virityssuodattimet), jotta vain tietty aallonpituus viritysvaloa näytteen läpi, kun taas muu valo absorboituu. Kun kutakin ainetta säteilytetään viritysvalolla, se emittoi hyvin lyhyessä ajassa näkyvää fluoresenssia, jonka aallonpituus on pitempi kuin säteilytetty valo. Fluoresenssilla on spesifisyys, yleensä viritysvaloa heikompi, jotta spesifinen fluoresenssi voidaan havaita objektiivissa, jonka taustalla on tarve lisätä estävä (tai vaimennus) suodatin.
Sen rooli on kaksijakoinen:
Yksi on absorboida ja estää viritysvalo okulaariin, jotta fluoresenssi ja silmävauriot eivät häiriintyisi.
Toinen on valita spesifinen fluoresenssi ja päästää sen läpi näyttäen tiettyä fluoresoivaa väriä. Nämä kaksi suodatintyyppiä on valittava ja käytettävä yhdessä.
