Fluoresenssimikroskoopin periaatteet ja rakenteelliset piirteet
Fluoresenssimikroskoopilla käytetään erittäin tehokasta pistevalonlähdettä tietyn valon aallonpituuden (kuten ultraviolettivalo 3650 tai violetti sininen valo 4200) säteilemiseen värisuodatinjärjestelmän kautta viritysvalolana, joka herättää näytteen fluoresoivia aineita fluoresenssin eri värejä ja sitten havaitsee objektiivisen linssin ja silmukan suurennuksen läpi. Tällä tavoin, jopa heikon fluoresenssin kanssa vahvalla taustalla, se on helppo tunnistaa ja sillä on suuri herkkyys. Sitä käytetään pääasiassa solurakenteen, toiminnan ja kemiallisen koostumuksen tutkimiseen. Fluoresenssimikroskoopin perusrakenne koostuu tavallisesta optisesta mikroskoopista ja joistakin lisävarusteista, kuten fluoresoivasta valonlähteestä, virityssuodattimesta, kaksoisvärisäteen jakajalle ja estävästä suodattimesta. Fluoresoiva valolähde - käyttää yleensä erittäin korkeaa paine -elohopeavalaisimia (50-200 W), jotka voivat säteillä eri aallonpituuksien valoa, mutta jokaisella fluoresoivalla aineella on viritysvalon aallonpituus, joka tuottaa voimakasta fluoresenssia. Siksi virityssuodattimet (yleensä ultravioletti, violetti, sininen ja vihreä virityssuodattimet) on lisättävä, jotta vain tietyn viritysvalon aallonpituuden läpi voidaan kulkea ja säteilyttää näytteen, samalla kun absorboi kaikki muut valot. Säteilytettyään viritysvalolla kukin aine emittoi näkyvää fluoresenssia aallonpituudella pidempään kuin säteilytysaallonpituus hyvin lyhyessä ajassa. Fluoresenssilla on spesifisyys ja se on yleensä heikompi kuin viritysvalo. Erityisen fluoresenssin havaitsemiseksi objektiivilinssin taakse on lisättävä estävä (tai tukahduttava) suodatin. Sen toiminnot ovat kaksinkertaiset: ensinnäkin absorboida ja estää viritysvaloa menemästä okulaariin, jotta vältetään häiritsevä fluoresenssi ja vahingoittaa silmiä; Toiseksi tietyn fluoresenssin kulkeminen ja salliminen läpi, ja siinä on tietty fluoresoiva väri. Kahden tyyppisiä suodattimia on käytettävä yhdessä.
