Fluoresenssimikroskoopin esitutkimus ja säätö:
(1) Ennen jokaista fluoresenssihavaintoa on tarpeen rutiininomaisesti tarkistaa fluoresenssilaitteen filamenttien kohdistus, optisen polun tarkennus, aukon aukko ja näkökentän aukon asetukset.
(2) Onko tarvittavat fluoresenssiviritys-/emissiosuodatinkomponentit asennettu muuntimeen, onko fluoresenssimikroskoopin objektiivi konfiguroitu oikein ja onko objektiivin linssin edessä olevat öljytahrat ja pöly poistettu.
(3) Samoin, kun tarkkaillaan eroa läpäisevässä valossa, on tarpeen tarkistaa tarkennuslinssin konjugaatio keskelle ja kontrastirenkaan konjugaatio objektiiviin.
(4) Tarkista, onko näytetelineessä (lasilasi, kansilasi ja muut astiat) roikkunut nestettä tai pölyä ja onko paksuus objektiivin kalibroiman työetäisyyden alueella. Viipaloidut näytteet eivät saa olla liian paksuja, noin 10 μm tai sitä pienempi suositellaan.
(5) Koska valonlähteessä on ultraviolettisäteilyä, lastaustason yläpuolelle tulee asettaa ruskea aurinkosuoja verkkokalvon UV-vaurioiden estämiseksi.
(6) Epävakaa jännite voi lyhentää suurjänniteelohopealamppujen käyttöikää, ja valonlähteen virtalähteeseen tulee lisätä jännitteensäädin.
(7) Elohopealampun käyttöiän pidentämiseksi se voidaan sammuttaa vasta 15 minuutin kuluttua sytytyksen jälkeen. Kun elohopealamppu on sammutettu, sen on odotettava vähintään 10 minuuttia, jotta elohopeahöyry jäähtyy takaisin alkuperäiseen tilaan, kun se käynnistetään uudelleen, muuten se vaikuttaa lampun käyttöikään.
Fluoresenssimikroskoopin kuvien tarkkailu:
(1) Kun loistelampun lähde on kytketty päälle noin 5-10 minuutiksi, virityksen intensiteetillä on taipumus vakiintua ja näyte ladataan tarkkailua varten; Jotta valon liiallinen virittyminen tarkennuksen ja kuvien etsimisen aikana ei aiheuttaisi näytteen fluoresenssisammutusta, pienennetään ensin fluoresenssimikroskoopin aukkoa tai lisätään ND-suodatin virityksen säätämiseksi kohtalaiseen intensiteettiin ja näyteastetta siirretään. säännöllisesti. Peilikuvan määrittämisen jälkeen se säädetään fluoresenssitilaan tallennusta varten.
(2) Säädöt huonolla kuvanlaadulla. Tarvittavat säätötoimenpiteet, jotka voidaan toteuttaa näytteen valmistelukertoimia lukuun ottamatta, ovat:
① Sulje pois varjostus- tai rajoittavia laitteita kuvantamisen optisella tiellä, kuten DIC-lisävarusteita, ND-suodattimia jne.
② Säädä uudelleen fluoresenssimikroskoopin keräimen tarkennus- ja aukkoaukon aukko.
③ Säädä varovasti fluoresenssimikroskoopin objektiivin peittävyyden korjausrengasta.
