Konfokaalinen laserpyyhkäisymikroskooppi
Konfokaalinen laserpyyhkäisymikroskooppi (laserkonfokaalinen pyyhkäisymikroskooppi), jossa käytetään laseria skannaavana valonlähteenä, nopea skannaus ja kuvantaminen piste pisteeltä, rivi riviltä ja pinta riviltä, pyyhkäisylaser- ja fluoresenssikokoelmalla on yhteinen objektiivilinssi ja objektiivilinssi skannaa laservalon polttopistettä, joka on myös aineen hetkellinen kuvantamispiste. Koska lasersäteen aallonpituus on lyhyt ja säde erittäin ohut, konfokaalisen laserpyyhkäisymikroskoopin resoluutio on korkea, mikä on noin 3 kertaa tavallista optista mikroskooppia. Kun järjestelmä on tarkennettu kerran, skannaus rajoittuu näytteen yhteen tasoon. Kun tarkennussyvyys on erilainen, näytteestä voidaan saada kuvia eri syvyystasoista. Nämä kuvatiedot tallennetaan tietokoneeseen. Tietokoneanalyysin ja simuloinnin avulla voidaan näyttää solunäytteen kolmiulotteinen rakenne.
Miksi tarvitset konfokaalimikroskoopin?
1. Suurten edeltäjiemme ponnistelujen ja parannusten jälkeen optinen mikroskooppi on saavuttanut täydellisyyden pisteen. Itse asiassa tavalliset mikroskoopit voivat tarjota meille kauniita mikroskooppisia kuvia yksinkertaisesti ja nopeasti. Kuitenkin tapahtui tapahtuma, joka toi vallankumouksellisen innovaation tähän lähes täydelliseen mikroskooppimaailmaan, joka on "laserpyyhkäisykonfokaalimikroskoopin" keksintö. Tämän uudentyyppisen mikroskoopin ominaisuus on, että se ottaa käyttöön optisen järjestelmän, joka poimii kuvainformaatiota vain pinnalta, johon kohdistus on keskittynyt, ja palauttaa saadun tiedon kuvamuistiin samalla kun vaihdat tarkennusta, jotta täydellinen 3D-tieto voidaan käsitellä. saatu. Karu kuva älykkyydestä. Tällä menetelmällä on mahdollista saada helposti tietoa pinnan muodosta, jota ei voida varmistaa normaalilla mikroskoopilla. Lisäksi tavallisissa optisissa mikroskoopeissa "resoluution lisääminen" ja "tarkennussyvyyden syventäminen" ovat ristiriitaisia olosuhteita, etenkin suurilla suurennoksilla, tämä ristiriita on selvempi, mutta konfokaalimikroskooppien kannalta tämä ongelma on helppo ratkaista.
2. Konfokaalisen optisen järjestelmän edut
Laserkonfokaalimikroskoopin kaavio
Konfokaalinen optinen järjestelmä suorittaa pistevalaistuksen näytteelle, ja pistereseptori vastaanottaa myös heijastuneen valon. Kun näyte asetetaan tarkennusasentoon, lähes kaikki heijastunut valo pääsee fotoreseptoriin, ja kun näyte on epätarkka, heijastunut valo ei pääse fotoreseptoriin. Toisin sanoen konfokaalisessa optisessa järjestelmässä vain polttopisteen kanssa yhteensopiva kuva tuodaan ulos ja valopisteet ja turha hajavalo suojataan.
3. Miksi käyttää laseria?
Konfokaalissa optisessa järjestelmässä näyte valaistaan pisteessä, ja heijastunut valo vastaanottaa myös pistevaloreseptorin. Siksi pistevalolähde tulee välttämättömäksi. Laserit ovat erittäin pistevalolähteitä. Useimmissa tapauksissa laservalolähteitä käytetään valonlähteinä konfokaalisissa mikroskoopeissa. Lisäksi laserin monokromaattisuus, suuntaus ja erinomainen säteen muoto ovat tärkeitä syitä sen laajalle käyttöönotolle.
4. Nopeaan skannaukseen perustuva reaaliaikainen havainnointi on mahdollista
Laserskannauksessa vaakasuunnassa käytetään akustista optista deflektoria (AO-elementti) ja pystysuuntaan servo-elektronisesti ohjattua säteen skannauspeiliä (Servo Galvano-peili). Koska akusto-optisessa poikkeutusyksikössä ei ole mekaanista tärinäosaa, se pystyy suorittamaan nopeaa skannausta ja reaaliaikainen havainnointi monitorin näytöltä on mahdollista. Tämä nopea kuvantaminen on erittäin tärkeä asia, joka vaikuttaa suoraan tarkennuksen ja paikanhaun nopeuteen.
