Johdatus käänteismikroskooppien ja fluoresenssimikroskooppien välillä valitsemiseen
Mikroskooppi on tärkeä väline soluviljelyssä ja siihen liittyvissä johdannaiskokeissa. Tällä hetkellä markkinoilla on erilaisia mikroskooppeja, ja tarpeisiin sopivan mikroskoopin valitseminen on haaste. Alla esittelemme käänteisten mikroskooppien ja fluoresenssimikroskooppien periaatteet valinnan helpottamiseksi.
Käänteisen mikroskoopin koostumus on sama kuin tavallisen mikroskoopin, joka koostuu pääasiassa kolmesta osasta: mekaanisesta osasta, valaisevasta osasta ja optisesta osasta. Käänteisen mikroskoopin koostumus on sama kuin tavallisen pystymikroskoopin, paitsi että objektiivilinssi ja valaistusjärjestelmä ovat päinvastaiset, edellinen lavan alapuolella ja jälkimmäinen tason yläpuolella. Tämä rakenne mahdollistaa valaistuksen tarkennusjärjestelmän ja näyttämön välisen tehollisen etäisyyden huomattavan suurentamisen, mikä helpottaa paksumpien havaintoinstrumenttien, kuten viljelymaljojen ja soluviljelypullojen sijoittamista (tietysti myös lasilevyt ovat hyväksyttäviä), kun taas objektiivin ja materiaalin välisen työetäisyyden ei tarvitse olla kovin suuri. Käänteistä mikroskooppia käyttävät lääketieteen ja terveydenhuollon laitokset, yliopistot ja tutkimuslaitokset mikro-organismien, solujen, bakteerien, kudosviljelmien, suspensioiden, sedimenttien jne. tarkkailuun. Se voi jatkuvasti tarkkailla solujen ja bakteerien lisääntymis- ja jakautumisprosessia elatusaineessa ja voi kaapata minkä tahansa tilan tämän prosessin aikana. Laajalti käytetty aloilla, kuten sytologia, parasitologia, onkologia, immunologia, geenitekniikka, teollinen mikrobiologia, kasvitiede jne.
Fluoresenssimikroskopiaa käytetään tutkimaan aineiden imeytymistä, kuljetusta, jakautumista ja lokalisointia soluissa. Testattavalle kohteelle on kaksi tapaa tuottaa fluoresenssi: spontaani fluoresenssi, joka emittoi suoraan fluoresenssia UV-säteilytyksen jälkeen; Toissijainen fluoresenssi tapahtuu, kun havaittu kohde käsitellään fluoresoivilla väriaineilla ja sitten säteilytetään ultraviolettivalolla fluoresenssin lähettämiseksi. Jotkut soluissa olevat aineet, kuten klorofylli, tuottavat spontaania fluoresenssia altistuessaan ultraviolettisäteilylle; Jotkut aineet eivät itse pysty säteilemään fluoresenssia, mutta jos ne värjätään fluoresoivilla väriaineilla tai fluoresoivilla vasta-aineilla, ne voivat säteillä myös sekundaarista fluoresenssia ultraviolettivalolla säteilytettyään. Fluoresenssimikroskooppi käyttää erittäin tehokasta pistevalolähdettä lähettämään tietyn aallonpituuden valoa (ultraviolettivalo 365 nm tai violetti sininen valo 420 nm) värisuodatinjärjestelmän läpi viritysvalona, joka virittää näytteen sisällä olevat fluoresoivat aineet lähettämään eri värejä fluoresenssia, ja sitten tarkkailee okulaariobjektiivia suurennuksen läpi. Tällä tavalla se on helppo tunnistaa ja herkkyys on korkea, vaikka fluoresenssi on heikko vahvalla taustalla. Sitä käytetään pääasiassa solurakenteen, toiminnan ja kemiallisen koostumuksen tutkimiseen.
