Laserpyyhkäisykonfokaalimikroskoopin laserintensiteetin säätäminen
① Tehonsäätönuppi: Yleensä asetettu 30 %:iin maksimiarvosta. Suurempi teho lyhentää laserin käyttöikää ja aiheuttaa laserkohinaa. Optimoi intensiteetti säätämällä ensin AOTF, PMT ja muut komponentit.
② Acousto-Optic Tunable Filter (AOTF): Se ohjaa viritysvalosädettä ja -intensiteettiä. Se voi kytkeä laserin päälle tai pois päältä millisekunnissa tai säätää laserin voimakkuutta jatkuvasti välillä 0 - 100%. Tämä mahdollistaa eri lasersäteiden ja valittujen intensiteettiarvojen soveltamisen jokaiseen kuvan pikseliin.
Toimintaperiaate: Se perustuu väliaineessa etenevien akustisten aaltojen indusoimaan tulevan valon Bragg-diffraktioon. Kun tietyn taajuuden RF-signaali syötetään, AOTF taittaa tulevan polykromaattisen valon ja valitsee monokromaattisen valon, jonka aallonpituus on λ. Valitun monokromaattisen valon aallonpituuden ja radiotaajuuden f välillä on yksi yhteen vastaavuus. Lähtöaallonpituutta voidaan muuttaa nopeasti ja satunnaisesti yksinkertaisesti virittämällä sähkösignaalia. AOTF mahdollistaa jatkuvan laserin intensiteetin säädön nopealla vasteella paikallista stimulaatiota, skannausta ja nopeaa aallonpituuden vaihtoa varten mikrosekuntitasolla.
Laserpyyhkäisykonfokaalimikroskoopissa fotomonistinputki (PMT) ei voi lisätä laserin intensiteettiä, mutta se säätää valosähköisen signaalin voimakkuutta lopulliselle kuvalle. Siksi valomonistinputken jännitteen säätäminen muuttaa kuvan kirkkautta. Lisäksi konfokaalisen neulanreiän koko vaikuttaa fotonien määrään ja sitä voidaan käyttää myös kuvan kirkkauden säätämiseen. Valomonistinputki on erityinen tyhjiöputki, joka on erittäin herkkä ultravioletti-, näkyvälle ja lähi-infrapunavalolle. Se vahvistaa heikot saapuvat optiset signaalit jopa 108 kertaa, jotta valosignaalit voidaan mitata.
