Fluoresenssimikroskopian taidot ja menetelmät
Fluoresenssimikroskoopin tekniset parametrit 1. Laajakulmainen okulaari 2. Akromaattinen objektiivi 3. Nelireikäinen objektiivimuunnin 4. Epi-fluoresenssilaite Sininen (B) Vihreä (G) viritysjärjestelmä 100W elohopealamppu 5. Koaksiaalinen karkean ja hienon tarkennuksen säätömekanismi: Säädä Tarkennusalue: 15 mm Mikroliikeruudukon arvo: 0,002 mm 6. Kaksikerroksinen mekaaninen pöytä Pituussuuntainen liikealue: 70 mm Sivusuuntainen liikealue: 50 mm
Fluoresenssimikroskoopin tekniset parametrit
1. Laajakulmainen okulaari
2. Akromaattinen objektiivi
3. Neljän aukon suukappale
4. Epi-fluoresenssilaite sininen (B) vihreä (G) viritysjärjestelmä 100W elohopealamppu
5. Koaksiaalinen karkean ja hienon tarkennuksen säätömekanismi: tarkennusalue 15 mm hieno liikeruudukon arvo 0,002 mm
6. Kaksikerroksinen mekaaninen työpöytä
Pystysuuntainen liikealue: 70 mm Sivusuuntainen liikealue: 50 mm
Fluoresenssimikroskopian taidot ja menetelmät
(1) Lasilasi
Lasilevyn paksuuden tulee olla 0,8–1,2 mm. Liian paksu objektilasi imee toisaalta enemmän valoa, toisaalta viritysvaloa ei voida keskittyä näytteeseen. Diojen on oltava sileitä, tasapaksuisia ja vailla ilmeistä autofluoresenssia. Joskus käytetään kvartsilasilevyjä.
(2) Peitelasi
Peitelasin paksuus on noin 0,17 mm, sileä. Viritysvalon vahvistamiseksi voidaan käyttää myös häiriöpeitelasia, joka on erityinen peitelasi, joka on päällystetty useilla ainekerroksilla (kuten magnesiumfluoridilla), joilla on erilaisia häiriövaikutuksia eri aallonpituuksille valolle, mikä voi tehdä fluoresenssi sujuu ongelmitta. Jännittävä valo kulkee läpi ja heijastuu, ja tämä heijastunut viritysvalo kiihottaa näytettä.
(3) Näyte
Kudosviipaleet tai muut näytteet eivät saa olla liian paksuja. Jos se on liian paksu, suurin osa viritysvalosta kuluu näytteen alaosassa, kun taas objektiivin linssin suoraan havaitsema yläosa ei ole täysin virittynyt. Lisäksi solujen päällekkäisyys tai epäpuhtauspeite vaikuttavat arvioon.
(4) Asennusaine
Glyseriiniä käytetään yleisesti kiinnitysaineena, joka ei saa olla autofluoresenssia, väritöntä ja läpinäkyvää, ja fluoresenssin kirkkaus on kirkkaampi pH:ssa 8.{1}}.5, eikä se ole helppo haalistua nopeasti. Sen vuoksi kiinnitysaineena käytetään yleisesti yhtä suurta seosta glyserolia ja 0,5 mol/l karbonaattipuskuriliuosta, jonka pH on 9.0 - 9,5.
(5) peiliöljy
Yleensä, kun tarkastellaan näytteitä tummakentän fluoresenssimikroskoopeilla ja öljyimmersio-immersiolinsseillä, on käytettävä immersioöljyä. On parasta käyttää erityistä ei-fluoresoivaa immersioöljyä. Sen sijaan voidaan käyttää myös yllä olevaa glyseriiniä ja myös nestemäistä parafiinia, mutta taitekerroin on alhainen, mikä vaikuttaa hieman kuvanlaatuun. Vaikutus.
