Fluoresenssimikroskopian ja konfokaalimikroskopian väliset erot
fluoresenssimikroskooppi
1. Fluoresenssimikroskooppi käyttää ultraviolettivaloa valonlähteenä tarkistettavan esineen säteilyttämiseen, aiheuttaen sen säteilyn fluoresenssiin ja tarkkailee sitten esineen muotoa ja sijaintia mikroskoopin alla. Fluoresenssimikroskopiaa käytetään tutkimaan solujen absorptiota, kuljetusta, jakautumista ja lokalisointia. Jotkut solujen aineet, kuten klorofylli, voivat fluoresoida, kun ne altistetaan ultraviolettisäteilylle; On myös joitain aineita, jotka eivät itse pääse fluoresenssiin, mutta voivat myös säteillä fluoresenssia, jos se on värjätty fluoresoivilla väriaineilla tai fluoresoivilla vasta -aineilla ja säteilytetään ultraviolettivalolla. Fluoresenssimikroskopia on yksi tällaisten aineiden laadullisen ja kvantitatiivisen tutkimuksen työkaluista.
2. fluoresenssimikroskooppi:
(A) Valonlähde: Valolähde säteilee erilaisten aallonpituuksien valoa (ultravioletista infrapuna).
(B) Virhe suodattimen valonlähde: tietyn aallonpituuden valon lähettäminen, joka voi aiheuttaa fluoresenssia näytteessä, samalla kun estävät valoa, joka on hyödytön jännittävälle fluoresenssille.
C) Fluoresoivat näytteet: värjätään yleensä fluoresoivilla pigmenteillä.
(D) Tukisuodatin: Se välittää selektiivisesti fluoresenssin estämällä herätysvalon, jota näyte ei absorboi, ja jotkut fluoresenssin aallonpituudet välitetään myös selektiivisesti. Mikroskooppi, joka käyttää ultraviolettivaloa valonlähteenä valaistun esineen, säteilee fluoresenssia. Elektronimikroskooppi kokosivat ensin Knorr ja Haruska Berliinissä, Saksassa vuonna 1931. Tämä mikroskooppi käyttää nopeaa elektronisäteitä valonsäteiden sijasta. Elektronivirran paljon lyhyemmän aallonpituuden vuoksi valon aaltoihin verrattuna elektronimikroskoopin suurennus voi saavuttaa 8 0 0000 kertaa, minimiresoluutiorajalla 0,2 nanometriä. Skannauselektronimikroskooppi, jota käytettiin ensimmäisen kerran vuonna 1963, antaa ihmisille mahdollisuuden nähdä pienet rakenteet esineiden pinnalla.
3. Sovellusalue: Käytetään pienten esineiden kuvien suurentamiseen. Käytetään yleensä biologian, lääketieteen, mikroskooppisten hiukkasten jne. Havainnoihin havainnoissa.
konfokaalimikroskooppi
1. Konfokaalimikroskooppi lisää puoliksi heijastavan puolilinssin heijastuneeseen valopolulle, joka taipuu heijastuneen valon, joka on kulkenut linssin läpi muihin suuntiin. Polkusuunnassa on ohjauspiste, jonka reikä sijaitsee polttopisteessä, ja ohjauslevyn takana on fotomultiplier -putki. Voidaan kuvitella, että heijastunut valo ennen havaitsemisvalon tarkennusta ja sen jälkeen ei voida keskittyä pieneen reikään tämän konfokaalisen järjestelmän läpi ja ohjaaja estää sitä. Joten fotometri mittaa heijastuneen valon voimakkuuden polttopisteessä.
2. Periaate: Perinteiset optiset mikroskoopit käyttävät kenttävalonlähteitä ja diffraktio tai hajallaan oleva valo näyttöön liittyvän näytteen kunkin pisteen kuvaan; Laserskannauskonfokaalimikroskooppi käyttää lasersädettä nastareiän valaistukseen ja muodostaa pisteen valonlähde skannataksesi näytteen polttotason jokaisen pisteen. Näytteen valaistu piste kuvataan havaitsemisneiän kohdalla, ja se vastaanotetaan pisteellä tai viivalla valontippilisellä putkella (PMT) tai kylmällä kytkentälaitteella (CCCD) pinholin havaitsemisen jälkeen, muodostaen nopeasti fluoresenssikuvan tietokoneen näytölle. Valaistusnan reikä ja havaitsemisneiti ovat konjugaatteja suhteessa objektiivilinssin polttoeliin. Polttotason pisteet keskittyvät samanaikaisesti valaistusnan reikään ja päästöjen reikään, ja polttotason ulkopuolella olevia pisteitä ei kuvattu havaitsemisneiän reikään. Tuloksena oleva konfokaalinen kuva on näytteen optinen poikkileikkaus, joka ylittää epäselvien kuvien haitta yleensä mikroskoopeilla.
