Mikro-organismien lukumäärän määritys - mikroskooppinen suora laskentamenetelmä!
Perusteellista
Mikroskooppinen suoralaskentamenetelmä on yksinkertainen, nopea ja intuitiivinen menetelmä asettaa pieni määrä testattavan näytteen suspensiota erityiselle lasilevylle (tunnetaan myös nimellä bakteerilaskuri), jolla on määrätty pinta-ala ja tilavuus, ja laskea suoraan näytteen alle. mikroskoopin. Tällä hetkellä kotimaassa ja ulkomailla yleisesti käytettyjä bakteerilaskureita ovat: verisolujen laskentataulu, Peteroff-Hauser-bakteerilaskuri ja Hawksley-bakteerilaskuri jne. Niitä kaikkia voidaan käyttää laskemaan suspensioita, kuten hiivaa, bakteereja ja homeitiöitä. perusperiaatteet ovat samat. Kahden jälkimmäisen bakteerilaskurin kokonaistilavuus on 0.02 mm3 peitelasilla peittämisen jälkeen, ja kansilasin ja objektilasin välinen etäisyys on vain 0,02 mm, joten pienet solut, kuten esim. bakteerit voidaan tarkkailla ja laskea öljyimmersioobjektiivilla. Näiden bakteerilaskurien käytön lisäksi on olemassa myös estimointimenetelmä, jolla voidaan suoraan tarkkailla sivelyalueen suhdetta näkökenttäalueeseen mikroskoopilla. Tätä menetelmää käytetään yleensä maidon bakteriologiseen tutkimukseen. Mikroskoopin suoran laskentamenetelmän etuna on, että se on intuitiivinen, nopea ja helppokäyttöinen. Mutta tämän menetelmän haittana on, että mitatut tulokset ovat yleensä kuolleiden ja elävien bakteerien summa. Tällä hetkellä on olemassa joitakin menetelmiä tämän puutteen poistamiseksi, kuten elävien bakteerien yhdistäminen mikrokammioviljelmän värjäämiseen (lyhyt aika) ja solunjakautumisen estäjien lisääminen, jotta saavutetaan tarkoitus laskea vain eläviä bakteereja.
Tässä kokeessa hemosytometriä käytettiin esimerkkinä suorien laskennan suorittamiseksi mikroskoopilla. Katso kahden muun bakteerilaskurin käyttötavat kunkin valmistajan ohjeista. Suora laskenta mikroskoopilla hemosytometrillä on yleisesti käytetty mikrobien laskentamenetelmä. Laskentalauta on erityisesti valmistettu lasiliukumäki, jossa neljä uraa muodostaa kolme alustaa; keskellä oleva leveämpi taso on jaettu kahteen puolikkaaseen lyhyellä vaakasuoralla uralla, ja alustan kumpikin puoli on vuorattu ristikolla. Jokainen ruudukko on jaettu yhdeksään suureen neliöön, ja keskimmäinen suuri neliö on laskentakammio. Laskentahuoneen mittakaavassa on yleensä kaksi eritelmää, joista toinen on, että suuri neliö on jaettu 25 keskiruutuun ja jokainen keskimmäinen neliö on jaettu 16 pieneen neliöön; toinen on, että suuri neliö on jaettu 16 keskiruutuun ja jokainen keskimmäinen neliö on jaettu 25 pieneen ruutuun, mutta riippumatta siitä, millainen laskentataulu on, siinä on 400 pientä ruutua. jokainen suuri neliö. Kunkin suuren neliön sivun pituus on 1 mm, ja sitten jokaisen suuren neliön pinta-ala on 1 mm 2. Peitelasin peittämisen jälkeen kansilasin ja liukulasien välinen korkeus on 0,1 mm, joten sen tilavuus laskentakammio on 0,1 mm (yksi millilitran kymmenesosa).
