Fluoresenssimikroskoopin periaatteiden soveltaminen ja käyttö
Fluoresenssimikroskooppien periaatteet ja rakenteelliset ominaisuudet: Fluoresenssimikroskoopit käyttävät pistevalolähdettä, jolla on korkea valotehokkuus, lähettämään tietyn aallonpituuden (kuten ultraviolettivaloa 3650 tuumaa tai purppuransinistä valoa 4200 tuumaa) valoa värisuodatinjärjestelmän kautta viritysvalona. herättää fluoresenssia näytteessä. Sen jälkeen kun aine emittoi erivärisiä fluoresenssia, sitä tarkkaillaan objektiivin ja okulaarin suurennuksen kautta. Tällä tavalla voimakkaan kontrastisen taustan alla, vaikka fluoresenssi on erittäin heikko, se on helppo tunnistaa ja sen herkkyys on korkea. Sitä käytetään pääasiassa solurakenteen ja toiminnan sekä kemiallisen koostumuksen tutkimiseen. Fluoresenssimikroskoopin perusrakenne koostuu tavallisesta optisesta mikroskoopista sekä lisävarusteista (kuten fluoresenssivalonlähde, virityssuodatin, kaksivärinen säteen jakaja, estosuodatin jne.). Fluoresoiva valonlähde - käyttää yleensä ultrakorkeapaineista elohopealamppua (50-200 W), joka voi lähettää eri aallonpituuksilla valoa, mutta jokaisella fluoresoivalla aineella on viritysaallonpituus, joka tuottaa voimakkaimman fluoresenssin, joten virityssuodatin ( Yleensä on olemassa ultravioletti-, purppura-, sininen ja vihreä virityssuodattimet), jotka sallivat vain tietyn aallonpituuden omaavan viritysvalon kulkea läpi ja valaistaa näytteen samalla, kun ne absorboivat kaiken muun valon. Kun kutakin ainetta on säteilytetty viritysvalolla, se emittoi näkyvää fluoresenssia pidemmällä aallonpituudella kuin säteilytyksen aallonpituus hyvin lyhyessä ajassa. Fluoresenssi on spesifistä ja yleensä heikompaa kuin viritysvalo. Tietyn fluoresenssin havaitsemiseksi objektiivin takana tarvitaan estävä (tai vaimentava) suodatin. Sillä on kaksi tehtävää: toinen on absorboida ja estää viritysvaloa pääsemästä okulaariin, jotta vältetään fluoresenssihäiriöt ja silmien vaurioituminen; toinen on valita spesifinen fluoresenssi ja antaa sen läpäistä tietyn fluoresenssivärin näyttämiseksi. Nämä kaksi suodatinta on valittava ja käytettävä yhdessä.
