Monifotonilaserpyyhkäisymikroskopian edut ja rajoitukset
1. Punaisen tai infrapunavalon virityksessä valon sironta on pientä (pienten hiukkasten sironta on kääntäen verrannollinen aallonpituuden neljänteen potenssiin).
2. Ei tarvita neulanreikiä, jotka pystyvät keräämään enemmän hajaantuneita fotoneja kuvantamispoikkileikkauksesta.
3. Neulanreiät eivät pysty erottamaan hajaantuneita fotoneja, jotka lähtevät defokusoiduilta tai polttoalueilta, ja monifotoneilla on parempi signaali-kohinasuhde syväkuvauksessa.
4. Näyte absorboi ja vaimentaa helposti yhden fotonin virittymiseen käytettyä ultraviolettivaloa tai näkyvää valoa ennen kuin säde saavuttaa polttotason, mikä vaikeuttaa syvien kerrosten virittämistä.
5. Biologisen mikroskooppisen havainnoinnin kannalta tärkeintä on olla vahingoittamatta itse organismin aktiivista tilaa ja ylläpitää veden, ionipitoisuuden, hapen ja ravinteiden kiertoa. Valon havainnoinnin alalla sekä lämpö- että fotonienergian tulee pysyä säteilyannoksen sisällä ja valoenergian, joka ei vahingoita soluja.
6. Monifotonimikroskoopilla on myös monia etuja. Kolmiulotteisen resoluution, syvyysinvaasion, sirontatehokkuuden, taustavalon, signaali-kohinasuhteen, ohjauksen jne. suhteen lasermikroskoopeilla on vertaansa vailla olevia tai ylivoimaisia ominaisuuksia, joita aiemmilla lasermikroskoopeilla ei ollut.
Monifotoninen konfokaalinen laserpyyhkäisymikroskooppi on laajennettu eri tutkimus- ja sovellusalueille Sillä voidaan suorittaa kolmiulotteisia tuhoamattomia havaintoja näytteille niiden luonnollisessa tilassa ja parantaa järjestelmän resoluutiota ja signaali-kohinasuhdetta Hyödyntämällä materiaalin ominaisuuksien muutoksia monifotonivirityksen, kolmiulotteisen korkeustiedon tallennuksen ja kolmiulotteisen sovelluksen avulla voidaan uskoa, että missä tahansa suunnassa voidaan saavuttaa korkeaa mikrovalmistusarvoa. Monifotonikonfokaaliseen mikroskopiaan liittyvien mekaanisten, materiaalien ja lasertekniikoiden kehittymisen myötä monifotonikonfokaalisen laserpyyhkäisymikroskopian kehitys ja sovellukset laajenevat
Haitat ovat seuraavat:
1. Vain fluoresenssikuvaukseen.
2. Jos näyte sisältää kromoforeja, jotka voivat absorboida viritysvaloa, kuten pigmenttejä, näyte voi altistua lämpövaurioille.
3. Resoluutio on hieman pienempi, vaikka sitä voidaan parantaa käyttämällä samanaikaisesti konfokaalisia pieniä reikiä, signaali häviää.
4. Kallien ultranopeiden lasereiden rajoituksista johtuen monifotonipyyhkäisymikroskooppien kustannukset ovat suhteellisen korkeat.
