Biologinen mikroskopia kudoslohkojen tilavuudesta
Biomikroskopia Tähän asti jääkylmäkiinnitys, jäädytetyt ultraohuet leikkeet ja pakastekuivakäsittely ovat rutiinimenetelmiä kudosten ja solujen mikrokentille. Menetelmän yksityiskohdat selitetään seuraavissa kohdissa:
Biologiset mikroskoopit Kondensaattorilinssillä varustettuja mikroskooppeja voidaan liikuttaa ylös ja alas kohtuullisen kirkkauden saavuttamiseksi tai säädettävän valon laajentimen aukkoa voidaan muuttaa kohtuullisen 9b-kirkkauden saavuttamiseksi. Jos valo on aurinkoista, kaukoputkea voidaan nostaa sopivasti ja säädettävän valon aukkoa voidaan suurentaa sopivasti. Jos valo on liian voimakas, kohdevalaisimen peili voi olla sopiva alaspäin, säädettävän valon aukko hyppää sopivaan vähennykseen. Jos tässä tapauksessa tuntuu edelleen sokaiselta, voit valita sopivan suodattimen, joka on sijoitettu valokeilaan kiinnikkeeseen. Tämä voidaan saada, jotta olet tyytyväinen kirkkauteen. Tietysti kondensaattorilinssin ylemmän ja alemman asennon säädössä valolukeman aukon kokoa ja sopivien suodattimien valintaa voi vaihdella, eli tietyn harjoittelun ja kokemuksen jälkeen.
Biologinen mikroskooppi Erittäin tärkeä kysymys on näytteenotto ja solujen erottaminen, pakastekuivaus ja hartsi upottaminen (FD) ultra-vihkosten pakastamisen jälkeen, pakastekuivaus jokaisen osan 65 alkuainekoostumuksen sisällöstä on oltava hienoajon jälkeen. käsitellä erittäin huolellisesti, eikä se saa vahingoittaa tarkkailtavia ja analysoitavia soluja. Koska röntgen-mikroalueanalyysi ei ole vain monta vaihetta ja kustannukset ovat erittäin korkeat, jos analysoidut solut ovat pitkän ajan ja useiden käsittelyvaiheiden jälkeen vaurioituneet tai kuolleet solut, tehdä vääriä johtopäätöksiä. on erittäin valitettavaa. Esimerkiksi kollagenaasikäsittelyllä eristetyillä sydänlihassoluilla on kaksi morfologiaa, joista toinen on pitkän sauvan muotoinen ja toinen pyöreä. Jälkimmäiset ovat kuolevia soluja, jotka vaurioituivat solun eristämisen aikana.
Biomikroskopia Elektrolyyttien sisältö ja jakautuminen näissä kahdessa kennotyypissä ovat hyvin erilaisia. Na oli erittäin korkea ja K erittäin alhainen pyöreissä sydänlihassoluissa, ja ca:n pitoisuus oli erittäin korkea mitokondrioissa. Tarkastuksen jälkeen muilla analyyttisilla menetelmillä osoitettiin, että korkea Na ja matala K pyöreissä soluissa ja korkea ca mitokondrioissa olivat seurausta solukalvon vaurioista solujen erottumisen aikana. Solujen ja kudosten kylmäkiinnitys tehdään usein sammutusfiksaatiolla, jota seuraa säilytys nestetypessä. Sammutuskiinnitys on tärkeä säilöntätehokkuuden kannalta. Elävissä soluissa tai tuoreissa kudoksissa on runsaasti vettä, kun sammutus tapahtuu usein solujen tai kudosten ja kylmäaineen (etenkin nestetypen puhtaana kylmänä) suorassa kosketuksessa ensimmäisen pakkaskiinnityksen osien kanssa, jolloin muodostuu "kuori", joka estää solun keskustan kylmän kiinnittymisen. Seurauksena on, että jääkiteitä löytyy usein suurempien solujen keskeltä röntgenmikrosoluanalyysin aikana. Tämän estämiseksi jäähdytysaineina käytetään aineita, joiden sulamispiste on korkeampi kuin nestemäinen typpi, mutta alle 806c kuiva. Tällaisia aineita on monia, mutta * helppo saada, halpa on tiivistetty propaani (kiehumispiste 42.120c, sulamispiste 187.10c, molekyylipaino 44.1), jäähdytysnopeus * nopea. Sen haittana on kuitenkin syttymisherkkyys.
Biologinen mikroskooppi voidaan sijoittaa erityisen hyllyn lihaskuidun päälle niin, että lihassäikeen supistuminen tietyn aikavaiheen saavuttamiseksi on kiinnitettävä, suutin käynnistetään välittömästi, jotta nestemäinen propaani pääsee lihaskuituihin, jotta lihaskuitujen supistuminen sammuu. kylmä korjaantui. Sitten lihaskuitu poistetaan yhdessä telineen kanssa ja laitetaan nestetyppeen. Jos vahvistamisesta verisoluja tai eristettyjä soluja, ensimmäinen hidas sentrifugointi, jotta solut keskittynyt, solut siirretään hyvä lämmönjohtavuus hopea putki, putki nestemäisen propaanin ruho kylmä kiinteä. Hall laboratorio kiinteä rotan haima, kaksi ensimmäistä teräspalaa nestemäisellä heliumilla (tai nestemäisellä typellä) esijäähdytyksellä, puristimella kiinnitettynä kaksi kuparipalaa asetetaan haiman eteen ja taakse, niin että täti rauhanen sammuttava kylmäkiinnitys. Kudoksia tai soluja voidaan säilyttää nestetypessä pitkään sammutuksen ja kiinnittämisen jälkeen.
