Mitä eroa on fluoresenssin ja laserkonfokaalimikroskopian välillä?
fluoresenssimikroskooppi
1. Fluoresenssimikroskooppi on laite, joka käyttää ultraviolettivaloa valonlähteenä testattavan kohteen valaisemiseen, jolloin se lähettää fluoresenssia ja tarkkailee sitten kohteen muotoa ja sijaintia mikroskoopin alla. Fluoresenssimikroskopiaa käytetään tutkimaan aineiden imeytymistä, kuljetusta, jakautumista ja lokalisoitumista soluissa. Jotkut soluissa olevat aineet, kuten klorofylli, voivat säteillä fluoresenssia ultraviolettisäteilylle altistumisen jälkeen; Jotkut aineet eivät välttämättä säteile fluoresenssia, mutta jos ne on värjätty fluoresoivilla väriaineilla tai fluoresoivilla vasta-aineilla, ne voivat säteillä fluoresenssia myös ultraviolettisäteilyssä. Fluoresenssimikroskopia on yksi näiden aineiden kvalitatiivisen ja kvantitatiivisen tutkimuksen työkaluista.
2. Fluoresenssimikroskoopin periaate:
(A) Valonlähde: Valonlähde lähettää valoa eri aallonpituuksilla (ultravioletista infrapunaan).
(B) Virityssuodattimen valonlähde: Lähettää tietyn aallonpituuden omaavaa valoa, joka voi tuottaa fluoresenssia näytteessä samalla, kun se estää valon, joka on hyödytön viritysfluoresenssille.
(C) Fluoresoivat näytteet: yleensä värjätty fluoresoivilla pigmenteillä.
(D) Estosuodatin: lähettää selektiivisesti fluoresenssia estämällä viritysvalon, jota näyte ei ole absorboinut, ja jotkin aallonpituudet lähetetään myös selektiivisesti fluoresenssina. Mikroskooppi, joka käyttää ultraviolettivaloa valonlähteenä lähettämään fluoresenssia säteilytetystä kohteesta. Knorr ja Harroska kokosivat ensimmäisen elektronimikroskoopin Berliinissä, Saksassa vuonna 1931. Tämän tyyppisessä mikroskoopissa käytetään nopeaa elektronisuihkua valonsäteen sijaan. Koska elektronivirran aallonpituus on paljon lyhyempi kuin valoaallot, elektronimikroskoopin suurennus voi nousta 800000-kertaiseksi, ja vähimmäisresoluutio on 0,2 nanometriä. Pyyhkäisyelektronimikroskoopilla, jota alettiin käyttää vuonna 1963, ihmiset voivat nähdä esineiden pinnalla olevat pienet rakenteet.
3. Sovellusalue: Käytetään pienten esineiden kuvien suurentamiseen. Yleensä käytetään biologian, lääketieteen, mikroskooppisten hiukkasten jne.
konfokaalinen mikroskooppi
1. Konfokaalinen mikroskooppi lisää heijastuneen valon reitille puoliheijastavan linssin, joka taivuttaa linssin läpi jo kulkeneen heijastuneen valon muihin suuntiin. Sen polttopisteessä on ohjauslevy, jossa on neulanreikä, ja pieni reikä sijaitsee polttopisteessä. Ohjauslevyn takana on valomonistinputki. Voidaan kuvitella, että heijastunut valo ennen ja jälkeen ilmaisuvalon polttopisteen ei voi keskittyä pieneen reikään tämän konfokaalisen järjestelmän läpi ja että ohjauslevy estää sen. Joten fotometri mittaa heijastuneen valon voimakkuutta polttopisteessä.
2. Periaate: Perinteiset optiset mikroskoopit käyttävät kenttävalonlähteitä, ja näytteen kunkin pisteen kuvaan vaikuttaa diffraktio tai hajavalo viereisistä pisteistä. Laserpyyhkäisykonfokaalinen mikroskooppi käyttää lasersädettä pistevalolähteen muodostamiseen valaistun neulanreiän läpi näytteen jokaisen polttotason pisteen skannaamiseksi. Näytteen valaistu piste kuvataan havaitsemisneulanreiässä, ja se vastaanotetaan piste pisteeltä tai riviltä valomonistinputkella (PMT) tai lämpösähköisellä kytkentälaitteella (cCCD) havaitsemisneulanreiän jälkeen, jolloin muodostuu nopeasti fluoresoiva kuva tietokoneen näytölle. näyttö. Valaistusneulanreikä ja tunnistusneulanreikä on konjugoitu suhteessa objektiivin polttotasoon. Polttotason pisteet tarkentuvat samanaikaisesti valaistuksen neulanreikään ja emissioneulanreikään, ja polttotason ulkopuolisia pisteitä ei kuvata tunnistusreiässä. Tämä johtaa konfokaaliseen kuvaan, joka edustaa näytteen optista poikkileikkausta, mikä poistaa tavanomaisessa mikroskopiassa epäselvien kuvien haitan.
3. Sovellusalat: lääketiede, eläin- ja kasvitutkimus, biokemia, bakteriologia, solubiologia, kudos ja alkio, elintarviketiede, genetiikka, farmakologia, fysiologia, optiikka, patologia, kasvitiede, neurotiede, meribiologia, materiaalitiede, elektroniikka, mekaniikka, öljygeologia ja mineralogia.
