Mitä eroa on fluoresenssimikroskopialla ja käänteisellä mikroskopialla?
Mikroskooppi on tärkeä väline soluviljelyssä ja siihen liittyvissä johdannaiskokeissa. Tällä hetkellä markkinoilla on erilaisia mikroskooppeja, ja tarpeisiin sopivan mikroskoopin valitseminen on haaste. Alla esittelemme käänteisten mikroskooppien ja fluoresenssimikroskooppien periaatteet, joista jokainen voi valita.
Käänteinen mikroskooppi, kuten tavallinen mikroskooppi, koostuu pääasiassa kolmesta osasta: mekaanisesta osasta, valoosasta ja optisesta osasta.
Käänteisen mikroskoopin koostumus on sama kuin tavallisen pystymikroskoopin, paitsi että objektiivilinssi ja valaistusjärjestelmä ovat päinvastaiset, edellinen lavan alla ja jälkimmäinen lavan yläpuolella.
Tämä rakenne laajentaa merkittävästi valonheittimen ja näyttämön välistä tehollista etäisyyttä, mikä helpottaa paksumpien havaintovälineiden, kuten viljelyastioiden ja soluviljelypullojen sijoittamista (tottakai myös lasilevyjä voidaan käyttää), kun taas työetäisyys valonheittimen välillä on helpompaa. objektiivi ja materiaalin ei tarvitse olla kovin suuri.
Käänteistä mikroskooppia käyttävät lääketieteen ja terveydenhuollon laitokset, yliopistot ja tutkimuslaitokset mikro-organismien, solujen, bakteerien, kudosviljelmien, suspensioiden, sedimenttien jne. tarkkailuun. Se voi jatkuvasti tarkkailla solujen ja bakteerien lisääntymis- ja jakautumisprosessia elatusaineessa, ja voi kaapata tämän prosessin minkä tahansa muodon.
Käytetään laajasti sellaisilla aloilla kuin sytologia, parasitologia, onkologia, immunologia, geenitekniikka, teollinen mikrobiologia ja kasvitiede.
Fluoresenssimikroskopiaa käytetään tutkimaan aineiden imeytymistä, kuljetusta, jakautumista ja lokalisoitumista soluissa.
Testattavalle kohteelle on kaksi tapaa tuottaa fluoresenssi: spontaani fluoresenssi, joka on suoraan ultraviolettisäteilyn lähettämä; Toissijainen fluoresenssi tapahtuu, kun havaittu kohde käsitellään fluoresoivilla väriaineilla ja altistetaan ultraviolettivalolle ennen fluoresenssin lähettämistä.
Jotkut soluissa olevat aineet, kuten klorofylli, tuottavat spontaania fluoresenssia altistuttuaan ultraviolettisäteilylle; Jotkut aineet eivät välttämättä säteile fluoresenssia, mutta jos ne värjätään fluoresoivilla väriaineilla tai fluoresoivilla vasta-aineilla, ne voivat säteillä myös sekundaarista fluoresenssia ultraviolettisäteilyn vaikutuksesta.
Fluoresenssimikroskoopissa käytetään korkean valotehokkuuden pistevalolähdettä, joka lähettää tietyn aallonpituuden valoa (UV 365 nm tai UV sininen 420 nm) värisuodatusjärjestelmän kautta viritysvalona, joka virittää näytteessä olevat fluoresoivat aineet lähettämään eri värejä fluoresenssia. Sen jälkeen sitä tarkkaillaan objektiivin ja okulaarin suurennuksella.
Tällä tavalla se on myös heikolla fluoresenssilla helposti tunnistettavissa ja erittäin herkkä voimakkaiden kontrastien taustalla. Sitä käytetään pääasiassa solurakenteen, toiminnan ja kemiallisen koostumuksen tutkimiseen.
