Fluoresenssimikroskooppeja on kahta tyyppiä niiden optisen polun perusteella:
1. Transmissiofluoresenssimikroskooppi: Viritysvalolähde välitetään näytemateriaalin läpi kondensaattorin kautta fluoresenssin virittämiseksi. Yleisesti käytettyjä pimeän kentän valonkerääjiä tai tavallisia valonkerääjiä voidaan käyttää heijastimen säätämiseen viritysvalon ja sivuvalon muuntamiseksi näytteeseen. Tämä on suhteellisen vanhanaikainen fluoresenssimikroskooppi. Sen etuna on, että fluoresenssi on vahva pienellä suurennuksella, kun taas sen haittana on, että fluoresenssi heikkenee suurennuksen kasvaessa. Siksi se on parempi tarkastella suurempia näytemateriaaleja.
2. Putoavan säteen fluoresenssimikroskooppi Tämä on uudentyyppinen fluoresenssimikroskooppi, joka on kehitetty nykyaikana. Toisin kuin edellinen, viritysvalo putoaa alas objektiivilinssistä näytteen pintaan käyttämällä samaa objektiivilinssiä kuin valaistuskondensaattori ja objektiivilinssi fluoresenssin keräämiseen. Optiselle tielle, joka on 45 asteen kulmassa kevyeen uraaniin nähden, on lisättävä kaksoisvärisäteen erotin. Viritysvalo heijastuu objektiiviin ja keskittyy näytteeseen. Näytteen tuottama fluoresenssi sekä objektiivin ja suojalasin pinnalta heijastuva viritysvalo menevät samanaikaisesti objektiivin linssiin ja palaavat dikroiseen säteen erottimeen erottaen virityksen ja fluoresenssin. Sulkusuodatin absorboi sitten jäännösvirityksen. Jos käytetään erilaisia virityssuodattimia / kaksivärisiä erottimia / estosuodattimien yhdistelmiä, ne voivat täyttää erilaisten fluoresoivien reaktiotuotteiden tarpeet. Tämän fluoresoivan mikroskoopin etuna on, että näkökentän valaistus on tasainen, kuvantaminen on selkeää ja mitä suurempi suurennus, sitä voimakkaampi fluoresenssi.
(2) Fluoresenssimikroskoopin käyttö
1. Kytke valonlähde päälle, ja ultrakorkeapaineista elohopealamppua on esilämmitettävä muutaman minuutin ajan, jotta se saavuttaa huippunsa.
2. Transmissiofluoresenssimikroskooppi vaatii tarvittavan virityssuodattimen asentamisen lampun lähteen ja kondensaattorin väliin ja vastaavan estosuodattimen asentamisen objektiivin taakse. Putoavan säteen fluoresenssimikroskoopin on asetettava tarvittava virityssuodatin/kaksoisvärisäteen erotin/estosuodatinlohko optisen polun aukkoon.
3. Tarkkaile pienitehoisella mikroskoopilla ja säädä valonlähteen keskikohta eri mallien fluoresenssimikroskooppien säätölaitteiden mukaan siten, että se sijaitsee koko valaistuspisteen keskellä.
4. Aseta näyteviipaleet ja tarkenna ne tarkkailua varten. Käytön aikana on huomioitava, että lopullista suodatinta ei tule tarkkailla suoraan silmillä silmävaurioiden välttämiseksi; Kun näytteitä tarkastellaan öljymikroskoopilla, on käytettävä erityistä ei-fluoresoivaa öljymikroskooppia; Kun korkeapaineelohopealamppu on sammutettu, sitä ei voi heti sytyttää uudelleen. Uudelleenkäynnistys kestää 5 minuuttia, muuten se on epävakaa ja vaikuttaa elohopealampun käyttöikään.
(3) Tarkasteltaessa fluoresenssimikroskoopilla opetusalustalla käyttäen sinivilaa valosuodatinta voidaan nähdä, että 0,01 prosentin akridiinioranssilla fluoresoivalla väriaineella värjätyt solut, tuma ja sytoplasma stimuloidaan tuottamaan kahta erilaista fluoresenssin värit (tummanvihreä ja oranssinpunainen).
