Fluoresenssimikroskoopin rakenne ja pääkomponentit
(1) Valonlähde
Nykyään valonlähteenä käytetään yleisesti 200 W:n ultrakorkeapaineista elohopealamppua. Se on valmistettu kvartsilasista, jonka keskellä on pallomainen muoto ja sisällä on tietty määrä elohopeaa. Käytön aikana kahden elektrodin välinen purkaus saa elohopean haihtumaan ja pallon sisällä oleva paine kasvaa nopeasti. Kun elohopea haihtuu kokonaan, se voi saavuttaa 50-70 normaalin ilmanpaineen, mikä kestää yleensä noin 5-15 minuuttia. Ultrakorkeapaineisten elohopealamppujen luminesenssi on seurausta elektrodien välisestä purkauksesta, joka jatkuvasti dissosioituu ja vähentää elohopeamolekyylejä ja emittoi fotoneja. Se säteilee voimakasta ultravioletti- ja siniviolettivaloa, joka riittää virittämään erilaisia fluoresoivia aineita, joten sitä käytetään laajalti fluoresenssimikroskoopeissa.
Ultrakorkeapaineiset elohopealamput lähettävät myös paljon lämpöenergiaa. Siksi lamppuhuoneessa on oltava hyvät lämmönpoistoolosuhteet ja työympäristön lämpötila ei saa olla liian korkea.
Uusi ultrakorkeapaineinen elohopealamppu ei vaadi korkeaa jännitettä syttyäkseen käytön alkuvaiheessa. Jonkin ajan käytön jälkeen se on käynnistettävä korkealla jännitteellä (noin 15 000 V). Käynnistyksen jälkeen käyttöjännite pidetään yleensä 50-60V:ssa ja käyttövirta on noin 4 A. 200 W:n ultrakorkeapaineisen elohopealampun keskimääräinen käyttöikä on noin 200 tuntia, kun sitä käytetään 2 tuntia kerrallaan. Mitä lyhyempi käyttöaika, sitä lyhyempi käyttöikä. Jos sitä käytetään vain 20 minuuttia kerran, käyttöikä lyhenee 50 %. Yritä siksi minimoida käynnistysten lukumäärä käytön aikana. Hehkulampun valoteho heikkenee vähitellen käytön aikana. Kun valo sammuu, sen on odotettava jäähtymistä ennen uudelleenkäynnistystä. Hehkulampun syttymisen jälkeen sitä ei saa sammuttaa välittömästi, jotta vältetään elohopean epätäydellinen haihtuminen ja elektrodin vaurioituminen. Yleensä sen on odotettava 15 minuuttia. Ultrakorkeapaineisen elohopealampun korkean paineen ja voimakkaan ultraviolettisäteilyn vuoksi hehkulamppu on asetettava lampun kammioon ennen sen syttämistä, jotta vältetään silmävammat ja räjähdys käytön aikana.
Ultrakorkeapaineisen elohopealampun (100 W tai 200 W) valonlähteen piiri ja sen komponentit, mukaan lukien jännitteen muunnos, virran vaimennus ja käynnistys. Lamppuhuoneessa on polttimon valokeskiön säätöjärjestelmä, jossa polttimon taakse on asennettu alumiinipinnoitettu kovera heijastin ja eteen valoa keräävä linssi.
Kotimaassa tuotetulla ultrakorkeapaineisella elohopealamppulla GCQ-200 on hyvä suorituskyky ja se voi korvata tuontipolttimot, kuten HBO-200. Sen keskimääräinen käyttöikä on yli 200 tuntia ja hinta suhteellisen alhainen.
Yksinkertainen ja kannettava korkean värilämpötilan bromivolframi fluoresoiva valonlähde, joka on kehitetty Kiinassa, pieni tilavuus, kevyt, pieni teho, kaksikäyttöinen AC ja DC (sisäänrakennettu tasavirtalähde), helppo kuljettaa, kätevä käyttää , on mainostettu ja käytetty.
(2) Värinsuodatusjärjestelmä
Värisuodatinjärjestelmä on tärkeä osa fluoresenssimikroskooppia, joka koostuu virityssuodatinlevystä ja puristussuodatinlevystä. Suodatinlevyn malli on usein epäjohdonmukainen valmistajien kesken. Suodatinlevyt on yleensä nimetty perusvärisävyn mukaan, jolloin ensimmäinen kirjain edustaa värisävyä, toinen kirjain lasia ja numero mallin ominaisuuksia. Olympus mikroskooppi
(3) Objektiivi
Erilaisia objektiivilinssejä voidaan käyttää, mutta akromaattisten objektiivilinssien käyttö soveltuu fluoresenssiin niiden erittäin alhaisen itsefluoresenssi- ja läpäisykyvyn (aallonpituusalueen) vuoksi. Koska kuvan fluoresenssin kirkkaus mikroskoopin näkökentässä on suoraan verrannollinen objektiivilinssin aukon neliöön ja kääntäen verrannollinen sen suurennukseen, fluoresenssikuvan kirkkauden parantamiseksi objektiivilinssi tulee käyttää suuremmalla aukkosuhteella. Varsinkin suurella suurennuksella sen vaikutus on erittäin merkittävä. Siksi näytteille, joiden fluoresenssi on riittämätön, tulee käyttää objektiivilinssiä, jolla on korkea aukkosuhde, yhdistettynä mahdollisimman pieneen okulaariin (4 x, 5 x, 6,3 x jne.).
(4) Heijastava peili
Heijastimen heijastava kerros on yleensä alumiinipinnoitettu, koska alumiini absorboi vähemmän ultraviolettivaloa ja näkyvää valoa sinisellä violetilla alueella yli 90 % heijastuksella, kun taas hopea heijastaa vain 70 %; Yleensä käytetään litteitä heijastimia.
(5) Kohdevalopeili
Erityisesti fluoresenssimikroskopiaan suunniteltu ja valmistettu konsentraattori on valmistettu kvartsilasista tai muusta lasista, joka läpäisee ultraviolettivaloa. On olemassa kahden tyyppisiä pimeän kentän spottereita, joilla on erillinen näkökenttä. Siellä on myös differentiaalinen fluoresenssikonsentraattori.
(6) Putoava valolaite
Uuden tyyppinen putoava valolaite heijastaa lyhyemmän aallonpituuden osat (ultravioletti ja purppuransininen) valonlähteestä häiriöspektrofotometrin suodattimeen johtuen suodattimen pinnoitteen ominaisuuksista. Kun suodatin on valonlähteeseen päin 45 asteen kulmassa. Kun sitä kallistetaan, se suunnataan pystysuunnassa kohti objektiivilinssiä ja suunnataan kohti näytettä objektiivin läpi, mikä saa näytettä virittymään. Tässä vaiheessa objektiivi toimii suoraan kondensaattorina. Samalla suodattimen pitkät osat (vihreä, keltainen, punainen jne.) ovat läpinäkyviä suodattimelle, joten ne eivät heijasta objektiivin suuntaan. Suodatin toimii virityssuodatinlevynä, ja koska näytteen fluoresenssi on näkyvän valon pitkän aallonpituuden alueella, se voidaan tarkkailla suodattimen läpi ja saavuttaa objektiivin. Fluoresenssikuvan kirkkaus kasvaa suurennuksen myötä ja on voimakkaampi kuin läpäisevä valonlähde suurella suurennuksella. Sen lisäksi, että se toimii läpäisevänä valonlähteenä, se soveltuu paremmin läpikuultavien ja puoliläpinäkyvien näytteiden, kuten paksujen levyjen, suodatinkalvojen, pesäkkeiden, kudosviljelmänäytteiden jne., suoraan tarkkailuun. Viime vuosina uudet fluoresenssimikroskoopit ovat usein käytä putoavan valon laitteita, jotka tunnetaan putoavan valon fluoresenssimikroskooppeina.
