Näytteenkäsittelymenetelmät ja elektronimikroskopian vaiheet
Ennen transmissioelektronimikroskoopin käyttöä biologisten näytteiden tarkkailuun, näytteet on esikäsiteltävä. Tiedemiehet käyttävät erilaisia käsittelymenetelmiä erilaisten tutkimusvaatimusten mukaisesti.
Kiinnitys: Jotta näyte säilyisi mahdollisimman hyvin, glutaraldehydiä käytetään näytteen kovetukseen ja osmihappoa rasvan värjäämiseen.
Kylmäkiinnitys: Näyte jäädytetään nopeasti nestemäiseen etaaniin, jotta vesi ei kiteydy vaan muodostaa amorfista jäätä. Tällä tavalla säilytetyissä näytteissä on vähemmän vaurioita, mutta kuvan kontrasti on erittäin alhainen.
Kuivuminen: Käytä etanolia ja asetonia veden tilalle.
Pehmustettu: Näyte voidaan jakaa pehmustuksen jälkeen.
Segmentointi: Näyte leikataan ohuiksi viipaleiksi timanttiterällä.
Värjäys: Raskaat atomit, kuten lyijy tai uraani, sirottavat elektroneja voimakkaammin kuin kevyemmät atomit, joten niitä voidaan käyttää kontrastin lisäämiseen.
Ennen kuin käytät transmissioelektronimikroskooppia metallien tarkkailuun, näytteen on oltava
Virukset elektronimikroskoopin alla
Leikkaaminen erittäin ohuiksi viipaleiksi (noin 0,1 mm) ja sen jälkeen elektrolyyttisellä kiillotuksella metallin ohentamisen jatkamiseksi johtaa usein siihen, että näytteen keskelle muodostuu reikä, jossa elektronit voivat kulkea erittäin ohuen metallin läpi. Metallit, joita ei voida kiillottaa elektrolyyttisesti, tai materiaalit, jotka eivät ole johtavia tai joiden johtavuus on huono, kuten pii, ohennetaan yleensä mekaanisesti ja käsitellään sitten ioniiskulla. Jotta sähköä johtamattomat näytteet eivät kerääntyisi staattista sähköä pyyhkäisyelektronimikroskoopissa, niiden pinnat on peitettävä johtavalla kerroksella.
Miksi elektronimikroskoopeilla on korkeampi resoluutio?
Kuten nimestä voi päätellä, niin kutsuttu elektronimikroskooppi on mikroskooppi, joka käyttää elektronisäteitä valonlähteenä. Koska elektronisuihku voi taipua ulkoisen magneettikentän tai sähkökentän vaikutuksesta muodostaen taittumisilmiön, joka on samanlainen kuin lasin läpi kulkevassa näkyvässä valossa, voimme käyttää tätä fysikaalista vaikutusta "linssin" luomiseen elektronisäteelle. elektronimikroskoopin kehittäminen. Transmissioelektronimikroskoopin (TEM) ominaisuus on, että käytämme elektronisäteitä, jotka kulkevat näytteen läpi kuvaan, mikä eroaa pyyhkäisyelektronimikroskoopista (Scanning Electron Microscope, SEM). Koska elektroniaaltojen aallonpituus on paljon pienempi kuin näkyvän valon aallonpituus (100kV elektroniaaltojen aallonpituus on 0,0037 nm, kun taas violetin valon aallonpituus on 400 nm), optisen mukaan teoriassa voimme odottaa, että elektronimikroskooppien erotuskyvyn pitäisi olla paljon parempi kuin optisten mikroskooppien. Itse asiassa nykyaikaisten elektronimikroskooppien resoluutio on saavuttanut 0,1 nm. Lukiolaisten valinnainen fysiikan oppikirja selittää sen tarkemmin (pientä tietoa valosähköilmiön takaa)
