Vaatimukset näytteiden tuottamiseksi fluoresenssimikroskooppia varten
(1) Lasilasi
Luistin paksuuden tulee olla 0,8–1,2 mm. Jos objektilasi on liian paksu, se toisaalta imee enemmän valoa, toisaalta se ei päästä viritysvaloa kerääntymään näytteen päälle. Lasin on oltava sileä, tasapaksuinen, eikä siinä saa olla selvää spontaania fluoresenssia. Joskus tarvitaan kvartsilasilevyjä.
(2) Peitelasilasi
Peitelasin paksuus on noin 0,17 mm ja se on sileä. Herätysvalon tehostamiseksi voidaan käyttää myös häiriösuojalasia. Tämä on erityisesti suunniteltu peitelasi, jossa on useita ainekerroksia (kuten magnesiumfluoridia), joilla on erilaiset häiriövaikutukset eri aallonpituuksilla. Se voi sallia fluoresenssin kulkea tasaisesti, kun taas heijastusviritysvalo voi virittää näytettä.
(3) Näyte
Kudosviipaleet tai muut näytteet eivät saa olla liian paksuja. Jos ne ovat liian paksuja, suurin osa viritysvalosta kuluu näytteen alaosassa, kun taas objektiivin linssin suoraan havaitsema yläosa ei ole täysin virittynyt. Lisäksi solujen päällekkäisyys tai epäpuhtauksien peittäminen voi vaikuttaa harkintaan.
(4) Tiivistysaine
Glyseriiniä käytetään yleisesti kiinnitysaineena, joka ei saa olla spontaania fluoresenssia, väritöntä ja läpinäkyvää. Fluoresenssin kirkkaus on suhteellisen kirkas pH:ssa 8.5-9.5, eikä sitä ole helppo häipyä nopeasti. Siksi glyserolin ja 0,5 mol/lpH9.0-9,5 karbonaattipuskurin seosta käytetään yleisesti kiinnitysaineena.
(5) Peiliöljy
Kun käytetään tummakenttäfluoresenssimikroskooppia ja öljymikroskooppia näytteiden tarkkailuun, on käytettävä linssiöljyä. On parasta käyttää erityisesti valmistettua ei-fluoresoivaa linssiöljyä, joka voidaan myös korvata glyserolilla, kuten edellä mainittiin. Myös nestemäistä parafiinia voidaan käyttää, mutta taitekerroin on alhainen ja sillä on pieni vaikutus kuvanlaatuun.
