Periaatteet laser fokaali mikroskopia (LSCM)
A laser confocal microscope uses an illumination pinhole placed behind the light source and a detection pinhole placed in front of the detector to achieve point illumination and point detection. Light from the light source is focused on a point in the focal plane of the sample by light emitted through the illumination pinhole, and fluorescence emitted from that point is imaged within the detection pinhole, and any emitted light outside of that point is blocked by the detection pinhole. The illumination pinhole and the detection pinhole are conjugate for the illuminated or detected point, so that the detected point is the confocal point and the plane where the detected point is located is the confocal plane. The computer displays the detected point on the computer screen in the form of an image point. In order to produce a complete image, a scanning system in the optical path scans over the focal plane of the sample, thus producing a complete confocal image. As long as the carrier stage is moved up and down along the Z-axis, a new level of the sample is moved to the confocal plane, and the new level of the sample is imaged on the monitor, as the Z-axis continues to move, successive light-cut images of different levels of the sample are obtained.
The traditional optical microscope uses a field light source, the image of each point on the specimen will be interfered with by the diffraction or scattering of light from the neighbouring points; laser scanning confocal microscope uses a laser beam through the illuminated pinhole to form a point light source on the specimen scanned at each point of the internal focal plane, the specimen on the irradiated point, the imaging of the detection pinhole, by the detection of pinhole after the point of light multiplication tube (PMT) or cold electrocoupled device (cCCD) Received point-by-point or line-by-line, a fluorescent image is rapidly formed on the computer monitor screen. Illumination pinhole and detection pinhole relative to the focal plane of the objective lens is conjugate, the point on the focal plane at the same time focused on the illumination pinhole and emission pinhole, the point outside the focal plane will not be in the detection of the pinhole at the imaging, so that the confocal image obtained is the specimen's optical cross-section, overcoming the shortcomings of the ordinary microscope image fuzzy.
Lähettäjä perus periaate % 2c laser konfokaali mikroskooppi on moderni optinen mikroskooppi % 2c se on tavallinen valo mikroskooppi tekniikasta tehdä tehdä seuraavat parannukset.
1. Käytä laseria kuten valo lähde koska yksivärisyys laser on erittäin hyvä % 2c aallonpituus valo lähde säde on sama % 2c pohjimmiltaan eliminoiva kromaattinen poikkeama.
2. The käyttö of confocal technology in the focal plane of the objective lens sijoitettu in the middle with a small hole in the baffle, the focal plane outside the stray light blocking, eliminoiva the pallomainen aberraatio; ja edelleen eliminoida the kromaattinen aberraatio.
3. Laser konfokaali mikroskooppi käyttämällä piste skannaus tekniikka hajottaa näyte osaksi kaksiulotteinen tai kolmiulotteinen avaruus osaksi lukemattomia pisteitä % 2c kanssa a pieni pieni säde (piste valo lähde) piste piste piste % 2c viiva viiva skannaus 2c ja sitten läpi mikrotietokone yhdistelmä a koko taso tai kolmiulotteinen kuva. perinteinen valo mikroskooppi on kenttä valo lähde alla kertaluonteinen kuvantaminen% 2c näytteet kukin piste kuva tulee vierekkäinen piste diffrakted valo valo häiriöt . näiden kahden kuvan selkeys ja tarkkuus ei voi vertailla.
4. Hankinta ja käsittely optiset signaalit kanssa tietokone ja vahvistus signaalit kanssa valokerroin putki
In the laser confocal mikroskooppi, tietokone korvaa ihminen silmä tai kamera tarkkailuun ja video tallennus, ja kuvat saatu ovat digitoitu ja voidaan prosessoida tietokoneella parantaa selkeys kuvista taakaksi taa. lisäksi, valomonistimen putkien voi vahvistaa hyvin heikko signaalit, suuresti parantaminen herkkyys. As a tulos yhdistetystä käytöstä käytöstä edellä mainitusta teknologiasta, it voi olla sanoa että the LSCM on edistynein mikroskooppi maailmassa It voi olla sanottu että LSCM on yhdistelmä mikroskoopin tuotanto teknologia, valosähköinen tekniikka, tietokone tekniikka **, on väistämätön tuote kehitys moderni teknologia.
