Optisten ja elektronimikroskopian näytteiden valmistusmenetelmät
Mikroskooppiset valmistusmenetelmät sisältävät yleensä neljä luokkaa: leikkausmenetelmä, koko asennusmenetelmä, sivelymenetelmä ja tabletointimenetelmä.
① Viipalointimenetelmä. Optisen mikroskoopin viipaleen paksuus on 2-25 mikronia. Yleensä noin 10 mikronin viipalepaksuus eläin- ja kasvimateriaalille on sopiva. Leikkausmenetelmät vaihtelevat upotusvälineen mukaan. Yleisesti käytettyjä ovat parafiinileikkausmenetelmä, puuvillakolloidileikkausmenetelmä, jäädytetty leikkausmenetelmä ja etyleeniglykolimetakrylaattimenetelmä (kutsutaan GMA-menetelmäksi). Parafiinileikkausmenetelmä sisältää vaiheita, kuten kiinnityksen, upotuksen, leikkaamisen, värjäyksen, kuivauksen ja kiinnityksen. Tärkeintä on upottaa biologinen materiaali parafiiniin, käyttää parafiinia tukina ja leikata vahalohkoon upotettu biologinen materiaali ihanteellisiksi ohuiksi viipaleiksi. Toimintaprosessi on: kiinnitys → vesipesu → alkoholin kuivaus vaiheittain alhaisesta pitoisuudesta korkeaan pitoisuuteen → ksyleenin läpinäkyvyys → vahakasto → upottaminen → leikkaus → laastari → ksyleenin vahanpoisto → vaiheittainen alkoholikäsittely korkeasta pitoisuudesta alhaiseen pitoisuuteen. Lopuksi se siirtyy veteen → värjäykseen → vaiheittaiseen kuivaukseen alhaisesta pitoisuudesta korkeaan alkoholipitoisuuteen → ksyleenin läpinäkyvyys → hartsiliimatiivistys. Perusvaiheet ovat samat kaikissa tuotantotekniikoissa.
② Integroitu tiivistysmenetelmä. Kokonainen valmistusmenetelmä yksittäisille soluille, pienille organismeille tai hajallaan oleville elimille. Tämä menetelmä vaatii myös erilaisia kiinnitys-, värjäys-, kuivaus-, läpinäkyvyys- ja asennusvaiheita. Tätä menetelmää käytetään paramecian ja hyönteisten suuosien valmistukseen.
③Smear menetelmä. Valmistusmenetelmä, jossa helposti hajoavat biologiset näytteet levitetään lasilevylle. Verikoe on yksi esimerkki.
④Tabletin puristusmenetelmä. Aseta luonnollisia ja helposti hajoavia kudoksia tai käsittelyn jälkeen helposti hajoavia kudoksia, kuten eläinten siittiöitä ja juuren kärkisoluja, lasilevylle, lisää kansilasi ja murskaa kudos voimalla, jotta solut tai solut saadaan sisälle. levitä yhteen tuotantomenetelmän kerrokseen. Puristusmenetelmää käytetään usein kromosomien tarkkailuun, jotka on yleensä värjätty magenta-asetaatilla, jäkälänpunaisella ja karbolifuksiinilla.
