Johdatus monifotonilaserpyyhkäisymikroskoopin etuihin ja haittoihin
Monifotonisen laserskannausmikroskoopin edut:
1. Punaisen valon tai infrapunavalon kiihottama valon sironta on pieni ja pienten hiukkasten sironta on kääntäen verrannollinen aallonpituuden neljänteen potenssiin.
2. Kuvausosasta voidaan kerätä lisää hajaantuneita fotoneja ilman reikiä.
3. Neulanreikä ei pysty erottamaan hajaantuneita fotoneja, jotka lähtevät epätarkalta tai tarkennusalueelta, ja monifotonikuvauksen signaali-kohinasuhde syvissä kerroksissa on hyvä.
4. Yksifotoniviritteeseen käytetty ultravioletti tai näkyvä valo absorboituu ja vaimenee helposti näytteeseen ennen kuin säde saavuttaa polttotason, eikä syvien kerrosten virittäminen ole helppoa.
5. Biologisen mikroskoopin havainnoinnin kannalta tärkeintä on olla vahingoittamatta itse organismin aktiivista tilaa ja ylläpitää veden, ionipitoisuuden, hapen ja ravinteiden kiertoa. Valon havainnoinnin yhteydessä sekä lämpö- että fotonienergian tulee pysyä säteilymäärän ja valoenergian sisällä, joka ei vahingoita soluja.
6. Monifotonimikroskoopilla on monia etuja. Kuten kolmiulotteinen resoluutio, syvä tunkeutuminen, sirontatehokkuus, taustavalo, signaali-kohinasuhde, ohjaus jne., kaikilla on ominaisuuksia, joita aiemmilla lasermikroskoopeilla ei ollut tai joita ei voitu ylittää.
Monifotonisen laserskannausmikroskoopin haitat:
1. Vain fluoresenssikuvaukseen.
2. Jos näyte sisältää kromoforeja, jotka absorboivat viritysvaloa, näyte voi vaurioitua termisesti.
3. Tarkkuus on hieman pienempi. Vaikka sitä voidaan parantaa käyttämällä samanaikaisesti konfokaalista aukkoa, signaali katoaa.
4. Kalliiden ultranopeiden lasereiden rajoitusten vuoksi monifotonipyyhkäisymikroskoopin hinta on suhteellisen korkea.
