Kuvausmenetelmät fluoresenssimikroskoopin kirkkaille ja tummille kentille
(1) Kirkaskenttäkuvaus (BFI), joka sallii vain paraksiaalisella alueella lähetetyt elektronit kulkea objektiivin aukon läpi muodostaen tumman kuvan kirkkaalle taustalle. Mitä pienempi objektiivin aukko on, sitä suurempi on kirkkaan kuvan kontrasti; (2) Dark field imaging (DFI), joka sallii vain osan suuren kulman sironneesta säteestä tai kiteen diffraktiosäteen kulkea objektiivin linssin aukon läpi samalla, kun se estää lähetetyn säteen. Tämä luo kirkkaan graafisen kuvan tummalle taustalle. Tämä tummakenttäkuvausmenetelmä voi parantaa kuvien kontrastia ja on tärkeä kuvantamismenetelmä.
Fluoresenssimikroskopialla on karkeasti neljä menetelmää pimeän kentän kuvantamiseen: (1) pystysuoran valaistuksen ylläpitäminen optista akselia pitkin samalla kun objektiivin aukkoa liikutetaan; (2) Vinovalaistuksen käyttöä hajaantuneiden säteiden saamiseksi optisen akselin suunnassa kutsutaan Center Dark Field Imaging -kuvaukseksi (CDFI); (3) Objektiivin linssin aukko, jossa on keskellä oleva säteen esto ja pyöreä läpinäkyvä alue; (4) Käytä pyöreää läpinäkyvää kohdevaloa valon havaitsemiseen ja objektiivin aukkoa, jonka keskellä on pyöreä reikä. Tässä esitetyt *-menetelmät ovat yksinkertaisia ja käteviä, mutta ne käyttävät elektronista kuvantamista etäholkin alueella, mikä johtaa suuriin poikkeamiin ja huonoon kuvanlaatuun. Toisella menetelmällä voidaan välttää edellä mainitut haitat, mutta Leica-fluoresenssimikroskoopin objektiiviaukko vastaanottaa vain pienen osan siroteltuja diffraktioituneita elektroneja, mikä johtaa alhaisempaan hyötysuhteeseen. Aukon sivua pommittaa usein suuri määrä elektroneja, mikä voi helposti aiheuttaa epäsymmetristä saastumista ja vaikuttaa kuvanlaatuun. Pyöreää tavoitetta on paranneltu tässä suhteessa, mutta haittana on, että sitä on vaikea tehdä ja täydellinen aksiaalisymmetria on vaikea saavuttaa. Valaistusjärjestelmän suhteellisen kevyet vaatimukset huomioon ottaen voidaan käyttää jälkimmäistä ratkaisua, joka sisältää pyöreän aukon lisäämisen lauhduttimeen onton valaistuksen aikaansaamiseksi näytteelle. Tämän laitteen vaikutus. Sen kuvan tarkkuus voi olla lähellä kirkkaiden kenttäkuvien resoluutiota, kun taas kontrasti paranee huomattavasti.
