Kuinka fluoresenssimikroskopia eroaa laserkonfokaalimikroskopiasta
Fluoresenssimikroskooppi
1, fluoresenssimikroskooppi on käyttää ultraviolettivaloa valonlähteenä, jota käytetään tutkittavan kohteen säteilyttämiseen siten, että se lähettää fluoresenssia, ja sitten tarkkailla kohteen muotoa ja sijaintia mikroskoopin alla. Fluoresenssimikroskoopilla tutkitaan kemiallisten aineiden imeytymistä, kulkeutumista, jakautumista ja lokalisointia soluissa. Jotkut solussa olevat aineet, kuten klorofylli, voivat fluoresoida ultraviolettivalon säteilytyksen jälkeen; Jotkut aineet eivät fluoresoi itsestään, mutta fluoresoivilla väreillä tai fluoresoivilla vasta-aineilla värjättyinä ne voivat fluoresoida myös ultraviolettivalolla säteilytettynä, ja fluoresenssimikroskopia on yksi työkalu tällaisten aineiden kvalitatiiviseen ja kvantitatiiviseen tutkimukseen.
2, fluoresenssimikroskoopin periaate:
(A) Valonlähde: valonlähde säteilee eri aallonpituuksilla valoa (ultraviolettista infrapunaan).
(B) viritys suodatin lähde: läpi näyte voi tuottaa fluoresenssin tietyn aallonpituuden valoa, mutta estää virityksen fluoresenssin hyödytöntä valoa.
(C) Fluoresoiva näyte: yleensä värjätty fluorokromilla.
(D) Estosuodattimet: estävät viritysvalon, jota näyte ei absorboi fluoresenssin selektiiviseksi lähettämiseksi, ja jotkin fluoresenssin aallonpituudet lähetetään myös selektiivisesti. Mikroskooppi, joka käyttää ultraviolettivaloa valonlähteenä säteilytetyn kohteen fluoresoimiseksi. Knorr ja Haroska kokosivat elektronimikroskoopin ensimmäisen kerran vuonna 1931 Berliinissä, Saksassa. Tämä mikroskooppi käyttää nopeaa elektronisuihkua valonsäteen sijaan. Koska elektronivirran aallonpituus on paljon lyhyempi kuin valoaalto, niin elektronimikroskoopin suurennus voi olla jopa 800,000 kertaa, 0,2 nanometrin vähimmäisrajan resoluutio . 1963 alkoi käyttää pyyhkäisyelektronimikroskooppia voidaan nähdä pinnalla esineen pieni rakenne.
3, soveltamisala: käytetään suurentamaan pienten esineiden kuvaa. Yleensä käytetään biologiassa, lääketieteessä, mikroskooppisissa hiukkasissa ja muissa havainnoissa.
Konfokaalinen mikroskooppi
1, konfokaalimikroskooppi tien heijastuneessa valossa plus puoliheijastava puolilinssi, on käynyt läpi linssin heijastuneen valon taitettuna muihin suuntiin, tarkennuksessaan ohjauslevyssä, jossa on neulareikä, reikä sijaitsee tarkennus, ohjauslevyn takana on valomonistinputki. Voidaan kuvitella, että heijastunut valo ennen ja jälkeen polttopisteen ilmaisimen valon läpi tämän konfokaalisen järjestelmän, ei pysty keskittymään pieneen reikään, se tukkeutuu ohjauslevyllä. Joten fotometri mittaa heijastuneen valon voimakkuutta polttopisteessä.
2, periaate: perinteinen optinen mikroskooppi käyttää kenttävalonlähdettä, näytteen kunkin pisteen kuvaa häiritsee valon diffraktio tai sironta viereisistä pisteistä; laserpyyhkäisykonfokaalinen mikroskooppi käyttää lasersädettä valaisevan neulanreiän läpi pistevalonlähteen muodostamiseksi näytteeseen kunkin näytteen pisteen skannauksen polttotasossa, näytettä säteilytetään, neulanreiän havaitsemiseksi kuvantamisessa Valon voimakkuus mitataan fotometrillä havaitsemalla neulanreikä valomonistinputken (PMT) tai kylmäsähkökytkentälaitteen (cCCD) jälkeen piste pisteeltä tai pisteeltä pisteeltä tai pisteeltä. cCCD) vastaanottaa piste pisteeltä tai rivi riviltä ja muodostaa nopeasti fluoresoivan kuvan tietokoneen näytön näytölle. Valaistuksen neulanreikä ja tunnistusneulanreikä suhteessa objektiivin polttotasoon on konjugoitu, polttotason piste keskittyy samanaikaisesti valaistuksen neulanreikään ja emissioneulanreikään, polttotason ulkopuolella oleva piste ei ole tunnistusreiässä kuvantaminen siten, että konfokaalinen kuva on optisen poikkileikkauksen näyte, joka voittaa tavallisten mikroskooppien epäselvien kuvien puutteet.
3, Sovellusalat: lääketiede, eläin- ja kasvitutkimus, biokemia, bakteriologia, solubiologia, kudosemryologia, elintarviketiede, genetiikka, farmakologia, fysiologia, optiikka, patologia, kasvitiede, neurotiede, meribiologia, materiaalitiede, elektroniikka, mekaniikka, öljygeologia, mineralogia.
