Fluoresenssimikroskoopit voidaan jakaa kahteen tyyppiin valopolun periaatteen mukaan:
1. Transmissiofluoresenssimikroskooppi
Vanhemmissa fluoresenssimikroskoopeissa viritysvalonlähde kulkee näytemateriaalin läpi kondensaattorin läpi virittämään fluoresenssia. Etuna on, että fluoresenssi on vahva pienellä suurennuksella, mutta haittana on, että fluoresenssi heikkenee suurennuksen kasvaessa. Joten se soveltuu vain suurempien näytemateriaalien tarkkailuun.
2. Epifluoresenssimikroskopia
Herätysvalo putoaa objektiivista alaspäin näytteen pinnalle, eli samaa objektiivilinssiä käytetään valaistuksen kondensaattorina ja objektiivina fluoresenssin keräämiseen.
Optiselle tielle, joka on 45o kulmassa optiseen akseliin nähden, on lisättävä dikroinen säteenjakaja (dikroinen peili). Viritysvalo heijastuu objektiiviin ja keskittyy näytteeseen. Näytteen tuottama fluoresenssi heijastuu objektiivin ja suojuksen pinnalta. Lasin pinnalta heijastuva viritysvalo tulee samanaikaisesti objektiivin linssiin ja palaa dikroiseen säteen jakajaan erottamaan viritysvalon ja fluoresenssin. Jäljellä oleva viritysvalo absorboituu sitten estosuodattimeen. Jos käytät erilaisia virityssuodattimia / kaksivärisiä säteen jakajia / estosuodattimia, voit vastata erilaisten fluoresenssireaktiotuotteiden tarpeisiin.
Tämän tyyppisen fluoresenssimikroskoopin etuna on, että näkökenttä on tasaisesti valaistu, kuva on selkeä ja mitä suurempi suurennus, sitä voimakkaampi fluoresenssi.
Mitkä ovat optisten mikroskooppien pääluokat?
1. Tavallinen optinen mikroskooppi
Tavalliset optiset mikroskoopit koostuvat pääasiassa seuraavista osista: valaistusjärjestelmä, joka sisältää valonlähteen ja lauhduttimen; optinen suurennusjärjestelmä, joka koostuu objektiivin linssistä ja okulaarista. Se on mikroskoopin kriittisin osa, ja se on suunniteltu liiallisen pallopoikkeaman ja kromaattisen aberraation välttämiseksi sekä okulaari että objektiivilinssi koostuvat monimutkaisista linssiryhmistä.
2. Laserkonfokaalinen skannausmikroskooppi
Laserkonfokaalinen skannausmikroskooppi kuulostaa erittäin huippuluokan ja monimutkaiselta. Itse asiassa se yksinkertaisesti käyttää laseria skannaavana valonlähteenä skannaamaan ja kuvaamaan kohteita nopeasti piste pisteeltä, viiva riviltä ja pinta pinnalta.
Lasersäteen lyhyemmän aallonpituuden perusteella säde itsessään on erittäin ohut, mikä määrittää konfokaalisen laserpyyhkäisymikroskoopin korkean resoluution, joka on noin kolme kertaa tavalliseen optiseen mikroskooppiin verrattuna. Tämän tyyppistä mikroskooppia käytetään solumorfologian tarkkailuun ja solunsisäisten biokemiallisten komponenttien kvantitatiiviseen analysointiin ja solumorfologian mittaamiseen.
3. Pimeä kenttämikroskooppi
Tummakenttämikroskoopin kondensaattorin keskellä on valolevy, joka estää valaistusvaloa pääsemästä suoraan objektiiviin. Vain näytteen heijastama ja taittuva valo pääsee objektiiviin. Siksi näkökentän tausta on musta ja objektien reunat kirkkaat.
