Monifotonin laserskannausmikroskopian etujen laajentaminen kattamaan
Laser-skannaus monishotonimikroskooppi on merkittävä optisen mikroskopian paraneminen, mikä ilmenee pääasiassa kyvystä tarkkailla elävien solujen, kiinteiden solujen ja kudosten syviä rakenteita ja saada selkeitä ja teräviä monikerroksisia Z-Plane-rakenteita, nimittäin optisia viipaleita, joita voidaan käyttää kolmiulottumattomien kiinteiden rakenteiden rakentamiseen. Konfokaalimikroskooppi käyttää laservalonlähdettä, joka laajennetaan täyttämään objektiivilinssin koko polttotason ja konvertoidaan sitten hyvin pieniksi pisteiksi näytteen polttotasolla objektiivilinssin linssijärjestelmän kautta. Objektiivilinssin numeerisen aukon mukaan kirkkaan valaistuspisteen halkaisija on noin 0. 25-0. 8 μm ja syvyys on noin 0. 5-1. 5 μm. Konfokaalisen pisteen koko määritetään mikroskooppisuunnittelun, laser -aallonpituuden, objektiivisten ominaisuuksien, skannausyksikön tila -asetusten ja näytteen ominaisuuksien avulla. Kenttämikroskoopin valaistusalue ja syvyys ovat suuret, kun taas konfokaalimikroskoopin valaistus on keskittynyt polttopisteeseen. Konfokaalimikroskopian perusetu on, että se voi suorittaa hienon optisen leikkauksen paksuilla fluoresoivilla näytteillä (enintään 5 0 μm tai enemmän), paksuuden ollessa noin 0,5 - 1,5 μm. Optisten siivukuvien sarja voidaan saada siirtämällä näyte ylös ja alas mikroskoopin Z-akselin askelmoottorilla. Kuvatietokokoelmaa ohjataan * * -tasossa ilman näytteen muista paikkojen lähettämistä signaaleista. Kun taustafluoresenssi on poistanut ja signaali-kohinasuhteen lisäämisen vaikutuksen, konfokaalisten kuvien kontrasti ja resoluutio paranee merkittävästi verrattuna perinteisiin kenttävalaistusfluoresenssikuviin. Monissa näytteissä monimutkaiset rakenteelliset komponentit yhdistävät monimutkaisten järjestelmien muodostamiseksi, mutta kun riittävästi optisia osia voidaan kerätä, voimme käyttää ohjelmistoja niiden rekonstruoimiseksi kolmessa ulottuvuudessa. Tätä kokeellista menetelmää on käytetty laajasti biologisessa tutkimuksessa solujen tai kudosten välisten monimutkaisten rakenteellisten ja toiminnallisten suhteiden selvittämiseksi.
