Konfokaalimikroskopian ja tavanomaisen optisen mikroskopian vertailu
Mikroskooppi on tärkein työkalu solujen tarkkailuun. Eri valonlähteiden mukaan se voidaan jakaa kahteen luokkaan: optiset mikroskoopit ja elektronimikroskoopit. Edellinen käyttää näkyvää valoa (ultraviolettimikroskooppi ultraviolettivaloa) valonlähteenä, kun taas jälkimmäinen käyttää elektronisuihkua valonlähteenä. Sekä tavalliset optiset mikroskoopit että laserkonfokaalimikroskoopit kuuluvat optisiin mikroskoopeihin.
Tavallinen optinen mikroskooppi
Yleinen biologinen mikroskooppi koostuu kolmesta osasta, nimittäin: ① valaistusjärjestelmä, mukaan lukien valonlähde ja lauhdutin; ② Optinen vahvistusjärjestelmä, joka koostuu objektiivista ja okulaarista, on mikroskoopin päärunko. Pallo- ja kromaattisen poikkeaman eliminoimiseksi sekä okulaari että objektiivi koostuvat monimutkaisista linssiryhmistä Mekaaninen laite, jota käytetään materiaalien kiinnittämiseen ja havainnoinnin helpottamiseen.
Mikroskoopin kuvan kirkkaus ei riipu vain sen suurennosta, vaan myös sen resoluutiosta. Resoluutiolla tarkoitetaan mikroskoopin (tai ihmissilmän, joka on 25 cm:n etäisyydellä kohteesta) kykyä erottaa esineet pienin välein. Erottelukyvyn suuruus riippuu valon aallonpituudesta, aukkoindeksistä ja väliaineen taitekertoimesta. Se ilmaistaan seuraavasti: R=0.61 λ/NANA=nsin /2, missä n=väliaineen taitekerroin; =aukkokulma (kulma, jossa näyte avaa objektiivin linssin aukon), NA=numeerinen aukko. Onko peilin kulma aina pienempi kuin 180?, joten zui:n maksimiarvon sina/2:lle on oltava pienempi kuin 1.
Optisten linssien valmistuksessa käytetyn lasin taitekerroin on 1.65-1.78, ja mitä lähempänä käytetyn väliaineen taitekerroin lasin taitekerroin on, sitä parempi. Kuivien objektiivilinssien tapauksessa väliaine on ilma ja aukkosuhde on yleensä 0.05-0.95; Öljylinssissä käytetään väliaineena setriöljyä, ja aukkosuhde voi olla lähellä 1,5.
Tavallisen valon aallonpituus on {{0}}nm, joten mikroskoopin resoluutioarvo ei ole pienempi kuin 0,2 μm ja ihmissilmän resoluutio on 0,2 mm. Siksi mikroskoopin suurin suurennus on yleensä 1000X.
